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2021
09-09

什么是无血清培养基？
无血清培养基(serumfreemedium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。简单地认为是体外细胞培养过程中的细胞培养基中不含有动物或人的血清，称为无血清细...
2021
09-09

什么是传代细胞培养？
原代细胞或细胞株或细胞系需在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的原代细胞或细胞株或细胞系或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续，这个过程体外培养称为传代细胞培养。一般认为，细胞培养形成单层汇合，...
2021
09-09

细胞培养的倍增和细胞培养的代数
细胞培养的倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。细胞培养的代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。PriCells提供...
2021
09-09

原代细胞的概述
在大多数人的印象中，原代细胞培养是一件很困难的事；*自己动手可能确实如此，但市场上那么多的原代细胞培养体系，相当程度上可以为你解除后顾之忧。原代细胞的质量取决于多个因素：组织、培养基、特别是它还与实验...
2021
09-07

什么是原代细胞、细胞株、细胞系？
原代细胞(primarycell)是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细...
2021
09-07

肿瘤原代细胞鉴定技术
一、形态学鉴定1.在倒置显微镜中直接观察活细胞的形态学特征2.细胞染色检查：a)将无菌玻片置于细胞培养皿中，加细胞悬液后培养；b)待细胞长满玻片后取出，用PBS清洗，之后放于载玻片上，待其自然干燥；c...
2021
09-07

原代细胞计数技术
1、准备计数板：用酒精清洁计数板及专用盖玻片，然后轻轻拭干。2、制备细胞悬液：用消化液分散单层培养细胞或直接收集悬浮培养细胞，制成单个细胞悬液。要求细胞密度不低于104/ml，若细胞数很少，应将悬液离...
2021
09-07

原代细胞染色技术
一．台盼蓝染色（1）制备单个细胞悬液，并作适当稀释（106细胞/ml)。（2）染色：取9滴细胞悬液移入小试管中，加一滴0.4%台盼蓝溶液，混匀。（3）计数：在3分钟内，用血球计数板分别计数活细胞和死细...
2021
09-07

原代细胞复苏技术
1、取出细胞，迅速放入37℃温水中快速解冻。2、吸出细胞悬液，并加10倍以上培养液。3、1000r/分钟离心5分钟，去除上清。4、用培养液适当稀释后接种培养瓶，放入37℃CO2培养箱静置培养。镜检细胞...
2021
09-06

原代细胞冻存技术
1、选用生长情况好，数量较多的原代细胞，冻存前一天换液一次。2、贴壁细胞需用0.25％胰酶常规消化将细胞消化下来，将细胞悬液收集至离心管中。3、1000rpm离心5分钟，弃上清液。4、沉淀加含DMSO...
2021
09-06

原代细胞无血清培养技术
1、弃去培养基废液。2、消化：加入1ml0.125％胰酶溶液，转动培养瓶使酶液浸没瓶底，温浴消化2-3分钟。3、终止：用无血清培养基终止酶反应。4、离心：收集中和了的培养液，于15ml的离心管中100...
2021
09-06

原代细胞传代技术
一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或与EDTA混合液）轻轻摇动培养瓶，使瓶底细胞都浸入溶液中。3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察，发...
2021
09-06

原代细胞培养技术
一、组织块直接培养法1、取材，用Hank's液洗涤三次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。2、用手术剪将组织剪切成1mm3左右的小块，再用Hank's液洗三次。3、将组织块转移至培养瓶，并贴附于瓶底面...
2021
09-06

原代细胞鉴定技术
一、形态学鉴定1.在倒置显微镜中直接观察活细胞的形态学特征2.细胞染色检查：a)将无菌玻片置于细胞培养皿中，加细胞悬液后培养；b)待细胞长满玻片后取出，用PBS清洗，之后放于载玻片上，待其自然干燥；c...
2021
08-30

原代细胞分离技术
取人或动物体内（或胚胎）的组织，将其剪碎至1mm3的组织块，再采用的如下方法进行分离培养：一、悬浮细胞的分离方法1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中，1000rpm/分钟离心5分钟。2、...

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