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MS/MS多肽測序的優(yōu)勢與局限

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品       牌百泰派克

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更新時間:2025-07-09 17:32:37瀏覽次數(shù):53次

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MS/MS多肽測序的優(yōu)勢與局限檢測技術服務: 多肽測序(Peptide Sequencing)技術,是指通過實驗手段確定多肽分子中氨基酸的排列順序(即一級結構)以及可能存在的翻譯后修飾(PTMs)的關鍵技術。通過該項技術,科研人員可確定多肽中氨基酸的線性順序(一級結構);定位翻譯后修飾(PTMs),揭示蛋白功能調(diào)控機制;而 MS/MS(串聯(lián)質(zhì)譜)通過選擇性母離子碎片化,MS/MS不僅提供氨基酸序列

MS/MS多肽測序的優(yōu)勢與局限檢測技術服務詳情介紹

多肽測序(Peptide Sequencing)技術,是指通過實驗手段確定多肽分子中氨基酸的排列順序(即一級結構)以及可能存在的翻譯后修飾(PTMs)的關鍵技術。通過該項技術,科研人員可確定多肽中氨基酸的線性順序(一級結構);定位翻譯后修飾(PTMs),揭示蛋白功能調(diào)控機制;而 MS/MS(串聯(lián)質(zhì)譜)通過選擇性母離子碎片化,MS/MS不僅提供氨基酸序列信息,還能定位翻譯后修飾(PTMs)及區(qū)分復雜樣品中的同分異構體,已成為這一領域的關鍵工具,為實現(xiàn)研究目的,MS/MS多肽測序的優(yōu)勢與局限成為了研究重點。


一、MS/MS多肽測序技術原理概述

MS/MS多肽測序的基本原理是利用高分辨質(zhì)譜技術,將dànbáizhì酶解后的多肽段離子化后進行質(zhì)量檢測(MS1),隨后選定母離子(前體肽段)進行選擇性碎片化(MS2),記錄碎片離子的質(zhì)量信息,推導氨基酸序列及翻譯后修飾信息。

核心步驟:

(1) 蛋白酶解:采用yídànbáiméi、Lys-C等特異性酶將dànbáizhì分解成多肽。

(2) 離子化與檢測:通過ESI(電噴霧電離)或MALDI(基質(zhì)輔助)實現(xiàn)離子化,MS1檢測肽段質(zhì)量。

(3) 選擇性碎片化(MS2):母離子在碰撞室中通過CID(碰撞誘導解離)、HCD(高能碰撞解離)或ETD/ECD(電子轉(zhuǎn)移/俘獲解離)生成b、y離子系列。

(4) 數(shù)據(jù)解析:比對實驗碎片譜與理論肽段(數(shù)據(jù)庫搜索),或采用de novo算法直接推導序列,定位翻譯后修飾(PTMs)信息。


二、MS/MS多肽測序的優(yōu)勢詳解

1、高靈敏度與分辨率

MS/MS結合高分辨質(zhì)譜(Orbitrap、FTICR),可實現(xiàn)亞ppm級質(zhì)量精度,靈敏度可探測低豐度、多修飾、多異構的肽段,顯著優(yōu)于傳統(tǒng)PMF(肽指紋圖譜)。


2、 提供氨基酸序列與修飾定位信息

通過b、y離子系列碎片譜,直接解析肽段氨基酸排列順序。jīngzhǔn定位PTMs(如磷酸化、糖基化、乙?;?、泛素化),揭示功能調(diào)控機制。


3、高通量解析復雜樣品

結合LC(液相色譜),可解析血漿、組織、細胞裂解液等復雜樣品中上千種多肽,適用于蛋白zhìzǔxué和臨床標志物研究。


4、多解離模式與AI算法加持

ETD/ECD解離保留修飾信息,適用于磷酸化、糖基化等易失修飾。HCD/CID解離適用于高能碎裂和常規(guī)多肽分析。結合AI算法(如Prosit、deepNovo)及深度學習,顯著提高碎片譜解析效率和準確度。


5、支持未知蛋白與新抗原發(fā)現(xiàn)

通過de novo測序,無需數(shù)據(jù)庫即可推導未知蛋白或非模式物種肽段序列,適用于新抗原發(fā)現(xiàn)、疫苗設計、疾病標志物篩選。


三、MS/MS多肽測序的局限性剖析

1、對儀器和操作要求高

需要高分辨、高靈敏度質(zhì)譜平臺(如Orbitrap Fusion Lumos、Q-Exactive HF-X),設備投資大、操作復雜。對樣品離子化效率要求高,需嚴格控制樣品純度與處理流程。


2、數(shù)據(jù)量大、解析復雜

MS/MS碎片譜數(shù)據(jù)龐大,需zhuānyè數(shù)據(jù)庫搜索(Mascot、MaxQuant、Byonic)和算法比對。大規(guī)模數(shù)據(jù)處理需高性能計算資源和算法優(yōu)化,耗時較長。


3、樣品準備與酶解挑戰(zhàn)

蛋白酶解效率低、肽段提取困難、鹽污染均會影響測序質(zhì)量。疏水肽段(如膜蛋白)難提取、電離效率低,需優(yōu)化樣品處理。


4、特殊修飾識別難度大

某些修飾(如O-糖基化)易在CID/HCD中脫落,導致修飾信息丟失。需采用ETD/ECD解離、化學標記等輔助策略。


5、同分異構體分辨能力有限

含相同氨基酸組成但不同順序的同分異構體肽段,碎片譜相似,難以區(qū)分。需結合保留時間、同位素分布和AI輔助判別。


四、MS/MS多肽測序的科研應用與前沿趨勢

1、應用領域

(1)蛋白zhìzǔxué:高通量解析蛋白表達、相互作用網(wǎng)絡,揭示生命過程機制。

(2)翻譯后修飾研究:定位磷酸化、乙酰化、糖基化等修飾位點,解析功能調(diào)控機制。

(3)新抗原發(fā)現(xiàn):應用于腫瘤miǎnyìzhìliáo、疫苗設計、疾病標志物挖掘。

(4)臨床診斷與jīngzhǔn醫(yī)學:篩選特異性肽段,用于早篩、診斷及療效監(jiān)測。

(5)生物制藥質(zhì)量控制:驗證蛋白藥純度、一致性、結構完整性。


2、發(fā)展趨勢

(1)多維質(zhì)譜與單細胞測序:推動從單肽到空間、單細胞層次解析。

(2)AI與深度學習輔助:提升復雜樣本肽段解析與修飾定位精度。

(3)多技術融合平臺:結合質(zhì)譜成像(MSI)、原位質(zhì)譜(DESI-MS),構建多維蛋白組學圖譜。


MS/MS多肽測序以其高分辨率、序列解析能力與修飾識別優(yōu)勢,已成為現(xiàn)代蛋白zhìzǔxué與生命科學研究中bùkětìdài的核心技術。作為蛋白zhìzǔxué與多肽測序領域的lǐngxiān企業(yè),百泰派克生物科技依托*質(zhì)譜平臺(Orbitrap Fusion Lumos、Q-Exactive HF-X、MALDI-TOF/TOF、ETD/ECD模塊)及自主研發(fā)的樣品制備與數(shù)據(jù)解析流程,提供從樣品到數(shù)據(jù)全流程多肽測序解決方案;高靈敏度檢測低豐度、多修飾肽段,提升數(shù)據(jù)質(zhì)量與解析深度;多引擎與AI算法加持,提高復雜樣本的準確率和效率;zhuānyè團隊與定制化支持,為科研與企業(yè)客戶量身定制測序方案,解決從樣品制備到數(shù)據(jù)解讀全鏈路需求,繼續(xù)致力于為全球科研人員與企業(yè)客戶提供高質(zhì)量、定制化的多肽測序解決方案,共同推動生命科學與生物醫(yī)藥創(chuàng)新發(fā)展。


百泰派克生物科技特色項目


一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。


※服務優(yōu)勢:

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。



二、蛋白zhìzǔxué

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結合Nano-LC,提供定量蛋白zhìzǔxué、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白zhìzǔxué分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白zhìzǔxué服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。


※服務優(yōu)勢:

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。



三、單細胞質(zhì)譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。


※服務優(yōu)勢:

1.技術*,*技術空白

采用金屬標記抗體技術,避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大,成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質(zhì)譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。



五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務,幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。



百泰派克生物科技七大檢測平臺

MS/MS多肽測序的優(yōu)勢與局限




百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎的CRO檢測分析服務;

2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務;

3.業(yè)務范圍覆蓋蛋白zhìzǔxué、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等;

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;

5.服務3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!



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