定量蛋白质印迹检测技术服务详情介绍

定量dànbáizhì印迹（Quantitative Western Blotting）旨在通过定量分析dànbáizhì的表达水平来揭示生物学过程。该技术基于传统的dànbáizhì印迹（Western Blotting），但通过引入定量分析，使得研究人员能够更jīngquè地测量目标蛋白的表达量。定量dànbáizhì印迹即dànbáizhì免疫印迹法中的定量分析方法，通常也叫做 Western Blot。与 Southern Blot 或 Northern Blot 杂交方法类似，但 Western Blot 法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是dànbáizhì，“探针" 是抗体，“显色" 用标记的二抗。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）分离的dànbáizhì样品，转移到固相载体（如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附dànbáizhì，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的dànbáizhì或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分，从而实现对dànbáizhì的定量分析。该技术能够帮助科学家理解dànbáizhì在细胞内的功能和作用机制，解析疾病过程中的dànbáizhì异常表达，为疾病诊断和治疗提供关键的线索。在药物研发过程中，定量dànbáizhì印迹可以用于评估药物对特定dànbáizhì或信号通路的影响，进而指导药物的优化和改进。

一、定量dànbáizhì印迹的常见方法与技术流程

1、样品制备与dànbáizhì转移

将细胞或组织样品通过裂解液处理获得可溶性蛋白。接下来进行dànbáizhì的电泳分离，通常使用SDS-PAGE技术。电泳完成后，通过电转移仪将dànbáizhì从凝胶转移到PVDF或NC膜上。

2、特异性抗体的使用

使用特异性抗体识别目标蛋白是定量dànbáizhì印迹的核心。初级抗体与目标蛋白结合，次级抗体与初级抗体结合，并通过酶或荧光标记实现dànbáizhì的检测。抗体的选择和优化直接影响实验结果的准确性和灵敏度。

3、信号检测与成像

信号检测通常通过化学发光或荧光成像系统来实现。通过成像仪器获取dànbáizhì信号的图像，并使用软件进行定量分析。选择合适的检测方式和成像参数是获取准确定量数据的保证。

4、数据分析与定量

使用zhuānyè的软件分析dànbáizhì印迹的数据，计算目标蛋白的相对表达量。通常需要对照内参蛋白以校正实验中的变异因素，确保定量结果的可靠性。

二、注意事项与常见问题

1、样品处理的标准化

样品制备中的任何微小差异都可能导致定量结果的偏差，因此需要严格控制样品处理的条件。

2、抗体的选择与验证

选择高特异性和高亲和力的抗体，并在实验前进行验证是获得可靠数据的基础。

3、信号的线性范围

确保检测信号处于线性范围内，以避免饱和现象对定量结果的影响。

4、背景噪声的控制

适当的封闭和洗涤步骤有助于降低背景噪声，提高信号的清晰度。

定量dànbáizhì印迹能够对低丰度蛋白进行检测，且具有很高的特异性。引入内参对照和标准曲线可以提高定量结果的jīngquè性和重复性。定量dànbáizhì印迹应用广泛，几乎适用于任何类型的dànbáizhì样品，包括细胞、组织和体液等。百泰派克生物科技的定量dànbáizhì印迹服务以其高效、准确的特性赢得广大科研机构的青睐。我们拥有经验丰富的技术团队和成熟的技术流程，能够为您提供量身定制的dànbáizhì分析方案。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对dànbáizhì序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对dànbáizhì的氨基酸组成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服务。对于未知理论序列的dànbáizhì，提供基于从头测序法的dànbáizhì从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、dànbáizhì组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量dànbáizhì组学、靶向dànbáizhì组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种dànbáizhì组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种dànbáizhì标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.zhuānyè生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，zuì后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题?？稍诘ハ赴忝嫔隙远嘀种副晖苯斜碚鳎偬┡煽松锟萍伎勺龅酵奔觳?1个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从zuì小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从dànbáizhì、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等zhuānyè服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，zhuānyè提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖dànbáizhì组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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