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dànbáizhì组学质谱是dànbáizhì组学研究中的核心技术,用于鉴定和定量分析生物样品中的dànbáizhì,以深入了解生物体内复杂的dànbáizhì网络。随着基因组学研究的深入,仅靠基因序列的信息已不足以揭示生物体的复杂性和动态特性。dànbáizhì组学质谱通过质谱技术对生物样本中的dànbáizhì进行全面分析,能够识别、定量和分析数以千计的dànbáizhì。此技术的核心在于质谱仪,它可以jīngquè测量dànbáizhì分子的质量、电荷比以及碎片信息,从而实现对dànbáizhì的鉴定和定量。其应用非常广泛,例如在疾病标志物的发现、药物靶点的鉴定、疾病机制的解析以及个性化医疗等方面都发挥着重要作用。通过对dànbáizhì的分析,研究人员可以揭示疾病发生的机制,并为开发新型治疗方法提供科学依据。
一、dànbáizhì组学质谱工作原理
1、离子化
将dànbáizhì或多肽样品转化为气态离子,以便在质谱仪的真空环境中进行分析。常见离子化方法有两种:
(1)电喷雾离子化(ESI):样品溶液在高电场作用下形成带电液滴,随着溶剂挥发,液滴变小,表面电荷密度增大,zuì终发生库仑爆炸,释放出气态离子。这种方法适用于分析极性和热不稳定的生物大分子,能产生多电荷离子,使质量分析范围大幅扩展,常用于液相色谱 - 质谱联用(LC - MS)系统。
(2)基质辅助激光解吸离子化(MALDI):将样品与过量的基质混合,干燥后形成共结晶。用脉冲激光照射样品,基质吸收激光能量并传递给样品分子,使其解吸并离子化。该方法产生的离子多为单电荷,适用于分析高分子量dànbáizhì,常与飞行时间质谱(TOF)联用,即 MALDI - TOF - MS。
2、质量分析
dànbáizhì组学质谱根据离子的质荷比(m/z)对dànbáizhì进行分离和检测。不同类型的质量分析器工作原理各异:
(1)四极杆质量分析器:由四根平行的金属杆组成,通过在杆上施加直流电压(DC)和射频电压(RF),形成特定的电场。只有特定质荷比的离子能够稳定通过四极杆,到达检测器被检测到,通过改变电压可扫描不同质荷比的离子。
(2)飞行时间质量分析器:离子在电场作用下获得相同动能,由于不同质荷比的离子飞行速度不同,经过一段无场飞行区域后,根据到达检测器的时间差异来确定其质荷比。飞行时间质谱具有高分辨率、宽质量范围等优点,适合分析大分子dànbáizhì。
(3)离子阱质量分析器:由环形电极和上下两个端盖电极组成,在电极间施加射频电压形成三维qiújìn场,将离子捕获在阱中。通过改变电压可选择性地激发并逐出不同质荷比的离子进行检测,可实现多级质谱分析(MS/MS)。
3、检测与数据处理:离子到达检测器后产生电信号,信号强度与离子数量成正比。质谱仪记录离子的质荷比和信号强度,生成质谱图。通过生物信息学软件将实验得到的质谱数据与dànbáizhì数据库进行比对,从而鉴定dànbáizhì的种类和序列。对于定量分析,可采用标记或非标记的方法,通过比较不同样品中相同dànbáizhì的信号强度差异来确定dànbáizhì的相对或juéduì含量。
二、在dànbáizhì组学中的应用
1、dànbáizhì鉴定
dànbáizhì组学质谱通过质谱分析获得dànbáizhì酶解后产生的肽段的质荷比信息,与数据库中已知dànbáizhì的理论肽段质量进行匹配,从而确定dànbáizhì的身份。这是dànbáizhì组学研究的基础,能够帮助研究人员了解生物样品中表达的dànbáizhì种类。
2、dànbáizhì定量分析
可分为相对定量和juéduì定量。相对定量用于比较不同样品(如疾病与正常组织)中dànbáizhì表达水平的差异,寻找与疾病发生发展相关的关键dànbáizhì。juéduì定量则是确定dànbáizhì在样品中的实际含量,对于了解dànbáizhì的生理功能和药物研发中的剂量控制具有重要意义。
3、翻译后修饰分析
dànbáizhì翻译后修饰(如磷酸化、乙?;⑻腔龋┗岣谋鋎ànbáizhì的质量,dànbáizhì组学质谱能够jīngquè检测到这些质量变化,从而鉴定修饰位点和修饰类型。研究dànbáizhì翻译后修饰有助于深入理解dànbáizhì功能的调控机制。
4、dànbáizhì相互作用研究
通过免疫共沉淀等技术富集与目标dànbáizhì相互作用的dànbáizhì复合物,再用质谱进行分析,可鉴定出相互作用的dànbáizhì,揭示dànbáizhì在细胞内的信号传导通路和功能网络。
dànbáizhì组学质谱具有高灵敏度和高通量特点,能够同时分析数千种dànbáizhì,灵敏度高于传统方法。并且能够实现全面的dànbáizhì覆盖,不仅可以识别dànbáizhì,还能检测dànbáizhì的翻译后修饰和相互作用。动态范围广,能够检测不同丰度水平的dànbáizhì,为生物样本的全面分析提供可能。百泰派克生物科技提供zhuānyè的dànbáizhì质谱鉴定服务,拥有经验丰富的专家团队和先进的技术平台,我们致力于为客户提供高质量的分析服务,助力科研工作者在生命科学领域取得更大的突破。无论是基础研究还是应用开发,我们都能为您提供可靠的技术支持,期待与您的合作。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对dànbáizhì序列进行分析,提供基于质谱的蛋白测序分析服务,包括对dànbáizhì的氨基酸组成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服务。对于未知理论序列的dànbáizhì,提供基于从头测序法的dànbáizhì从头测序服务,对蛋白序列进行分析。
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2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;
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5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug,即可完成检测;
6.测序不受N端封闭,PEC和和糖基化等N端修饰的影响。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,提供定量dànbáizhì组学、靶向dànbáizhì组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种dànbáizhì组学分析服务。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì组学服务,助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。
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百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析,采用金属元素标记物(通常是金属元素标记的特异抗体)标记细胞表面和内部的分子,然后用流式细胞原理分离单个细胞,再用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析单个细胞的原子质量谱,zuì后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。
※服务优势:
1.技术先进,填补技术空白
采用金属标记抗体技术,避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征,百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。
2.分析数量大,成本较低
单细胞RNAseq受成本等因素限制,所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右,而流式质谱技术一次(单样本)就可分析至少10^5的细胞,实现了数量级的提高,且成本不高于单细胞RNAseq。
3.应用前景大
①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化,在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景;
②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外,质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰;
③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析,可从zuì小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究,旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案,深入挖掘未知的靶标。
百泰派克基于高分辨率质谱技术,MALDI TOF,高效色谱分离技术,提供一系列完善的生物药物分析方案,从dànbáizhì、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析,到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务,帮助生物医药生产商提高生物药物品质。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等zhuānyè服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。
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2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;
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