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Edman降解是什么?蛋白质测序的核心技

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品       牌百泰派克

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更新时间:2025-06-09 15:06:31浏览次数:89次

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Edman降解是什么?dànbáizhì测序的核心技术解析检测技术服务: dànbáizhì是生命活动的执行者,其一级结构(氨基酸序列)决定了其功能。要研究dànbáizhì的结构与功能,首先必须了解其氨基酸组成和排列顺序。因此,dànbáizhì测序成为现代生命科学研究和生物医药开发中的关键步骤。而在众多测序方法中,Edman降解(Edman degradation)被誉为dànbáizhì一级

Edman降解是什么?蛋白质测序的核心技术解析检测技术服务详情介绍

dànbáizhì是生命活动的执行者,其一级结构(氨基酸序列)决定了其功能。要研究dànbáizhì的结构与功能,首先必须了解其氨基酸组成和排列顺序。因此,dànbáizhì测序成为现代生命科学研究和生物医药开发中的关键步骤。而在众多测序方法中,Edman降解(Edman degradation)被誉为dànbáizhì一级结构解析的“经典之选"。


一、什么是Edman降解?

Edman降解是一种用于确定dànbáizhìN端氨基酸序列的化学方法,由澳大利亚化学家Pehr Edman于1950年开发。其核心原理是:通过苯异硫氰酸酯(PITC)选择性标记肽链的N端氨基酸,在温和条件下裂解形成可识别的PTH-氨基酸衍生物,同时保留剩余肽链用于下一轮循环。这种逐步“剥离"氨基酸的方式,可以顺序解析出dànbáizhìN端的氨基酸组成。


二、Edman降解的反应流程:

1、标记:PITC与肽链N端游离氨基反应,形成环状酰胺中间体。

2、裂解:在酸性条件下切断N端dìyī个氨基酸,与PITC形成稳定的PTH-氨基酸。

3、鉴定:使用高效液相色谱(HPLC)或其他方法检测PTH-氨基酸种类。

4、重复循环:重复以上步骤,逐个剥离氨基酸,直到达到测序上限(一般为30个残基以内)。


三、Edman降解的优势与局限

? 优势:


  • 高保真度:逐个氨基酸识别,序列准确性高。

  • 无需标签:不需要对目标蛋白进行同位素或荧光标记。

  • 对已纯化蛋白有效:适用于单一dànbáizhì样本的序列验证。


? 局限性:


  • N端封闭限制:若蛋白N端被修饰(如乙酰化、甲酰化),将无法进行Edman反应。

  • 不适合复杂混合物:只能对单一、多肽纯度较高的样本有效。

  • 序列长度有限:一般测序上限为20–30个氨基酸残基,无法覆盖全长蛋白。

  • 对蛋白量有要求:通常需要≥1 pmol级别的纯蛋白输入量。


四、Edman降解在科研中的应用

尽管现代质谱(MS)技术逐渐成为主流,Edman降解依然在以下领域具有dútè价值:

1、dànbáizhìN端验证

在重组蛋白表达与纯化后,研究人员常使用Edman降解确认目标蛋白是否有N端截断、修饰,或起始密码子翻译是否正确。


2、抗体表位测序

Edman法适用于对单一多肽(如抗原肽、B细胞表位)进行序列确认,特别是在开发多克隆或单克隆抗体时。


3、结合质谱进行双重验证

在某些关键项目中,如临床级蛋白药物开发、蛋白工程研究,研究者会同时使用Edman降解和LC-MS/MS对序列进行交叉确认,确保结果无误。


五、Edman降解 vs 质谱测序:互为补充


Edman降解是什么?蛋白质测序的核心技


? 实践经验显示,在Nduāncèxù、药物质量控制、定量标准品开发等领域,两者联用效果zuì佳。


Edman降解作为dànbáizhì测序的奠基性技术,其高精度与可解释性在某些应用中依然wúkětìdài。百泰派克生物科技坚持以科研需求为导向,致力于为高??翁庾椤⒖蒲谢辜吧镆揭┭蟹⑼哦犹峁└弑曜?、可信赖的蛋白测序解决方案与技术支持。


百泰派克生物科技特色项目


一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对dànbáizhì序列进行分析,提供基于质谱的蛋白测序分析服务,包括对dànbáizhì的氨基酸组成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服务。对于未知理论序列的dànbáizhì,提供基于从头测序法的dànbáizhì从头测序服务,对蛋白序列进行分析。


※服务优势:

1.采用目前世界上优良的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug,即可完成检测;

6.测序不受N端封闭,PEC和和糖基化等N端修饰的影响。



二、dànbáizhì组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,提供定量dànbáizhì组学、靶向dànbáizhì组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种dànbáizhì组学分析服务。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì组学服务,助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。


※服务优势:

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析,发现新的生物标记物;

2.体内体外多种dànbáizhì标记方法,适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高,实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白,线性范围广;

5.zhuānyè生物信息学分析,分析更系统准确。



三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析,采用金属元素标记物(通常是金属元素标记的特异抗体)标记细胞表面和内部的分子,然后用流式细胞原理分离单个细胞,再用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析单个细胞的原子质量谱,zuì后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。


※服务优势:

1.技术优良,*技术空白

采用金属标记抗体技术,避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题??稍诘ハ赴忝嫔隙远嘀种副晖苯斜碚?,百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大,成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制,所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右,而流式质谱技术一次(单样本)就可分析至少10^5的细胞,实现了数量级的提高,且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化,在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景;

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外,质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰;

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析,可从zuì小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究,旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案,深入挖掘未知的靶标。



五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术,MALDI TOF,高效色谱分离技术,提供一系列完善的生物药物分析方案,从dànbáizhì、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析,到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务,帮助生物医药生产商提高生物药物品质。



百泰派克生物科技七大检测平台

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百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等zhuānyè服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系,zhuānyè提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;

2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;

3.业务范围覆盖dànbáizhì组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;

4.七大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;

5.服务3000+企业,10000+客户的选择;

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!



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