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PriCells: 正常晶状体上皮细胞原代培养
PriCells: 正常晶状体上皮细胞原代培养
实验材料：
1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；
2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；
3. 器械：无齿显微小镊子2把、培养板和培养皿若干；
4. 培养液：为含15%胎牛血清的DMEM培养液；
实验方法：
1. 取材
1）摘取动物或人的供体眼球，作常规消毒处理；
2）用刀片沿角巩膜缘环形剪开眼球，除去角膜和虹膜，并用角膜剪刀剪断晶状体悬韧带，取出晶状体，置于培养皿中；
3）用PBS液洗去黏附在晶状体表面的虹膜色素及玻璃体。弃去洗液；、
4）将晶状体的凸面向下，用4号针头于晶状体赤道部稍靠后的部位环刺一圈，然后用两把无齿显微镊子轻轻分离出晶状体前囊膜；
2. 原代培养；
1）取下晶状体前囊膜后，一般不经洗涤。将其剪成余额1.5mm×1.5mm的植块；
2）用无齿显微镊子挑起植块，平贴于培养板中；
3）置于37℃恒温箱中约5min，待组织块稍干后便可加入培养液；
4）按常规方法培养。每周换培养液2次，每次更换2/3的培养液量；
3. 传代培养：在培养细胞基本融合形成单层时即需传代。否则细胞会因生存空间不足或由于细胞密度过大而致营养不足。按常规方法进行传代培养；
PriCells提供：
1. 各种原代细胞特制基础培养基；
2. 各种原代细胞培养特制添加剂；
3. 原代细胞分离试剂盒；
4. 原代细胞鉴定试剂盒；
5. 原代细胞总蛋白质抽提物；
6. 原代细胞总RNA；
7. 原代细胞总DNA；