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為什么STR鑒定對于ATCC細胞系來說很重要

2021-5-17 閱讀(2244)

   ATCC 成立于 1925 年,是大的生物資源中心,由美國 14 家生化、醫學類行業協會組成的理事會負責管理,是一家全球性、非盈利生物標準品資源中心。
  進行細胞系STR鑒定是很重要的。很多生物醫藥的研究都采用培養細胞來進行,這些細胞可能是受贈于其它研究人員,也可能是從細胞庫(如美國?ATCC,American?Type?Culture?Collection)得來。據估計,15-20%的實驗室,實驗中所使用的細胞已經不是原來的細胞系,或者與其它細胞系發生了交叉污染。顯然,細胞系遭到污染、特征鑒別錯誤,將會極大的威脅著基于這些細胞而發表的論文質量和研究發現的正確性。為此,很多細胞庫現在都要對提交來的細胞系進行鑒定,并對細胞系之間的交叉污染進行監測。
  現在很多機構都已經認識到這個的重要性,ATCC和FDA,這些機構要求對用于制藥領域的實驗中所使用的材料?—?諸如細胞系?—?應該進行“身份鑒定”和純度測試。很多雜志也要求使用細胞系的文章提供STR指紋圖譜數據。
  FDA建議研究人員在培養細胞的較早階段(細胞培養第一周)來鑒定細胞系的身份。細胞在被凍存前應再一次進行鑒定;對于活躍生長的細胞,每兩個月應鑒定一次;文獻發表前也應對細胞系身份進行鑒定。
  細胞如何運輸?收到細胞后如何處理?
  從美國運輸過來的原裝 ATCC 細胞都是冰凍形式,采用干冰運輸的方式。在收到凍存細胞后,很重要的一點是迅速復蘇。
  如果做不到立即復蘇,需將細胞存儲在液氮中。請不要將細胞存放在 -80 ℃ 冰箱,這會使細胞存活率迅速下降。
  使用什么培養基?
  復蘇細胞時需要準備合適的培養基,血清和細胞生長所需的添加劑。雖然大多數細胞系可以在不止一種培養基中生長,但是當培養基改變時,細胞的性質也會變化。
  另外,有的培養基如 DMEM,各廠商提供產品雖然名稱相同,但成分也會有差異。為了保證細胞最大的復蘇率和維持細胞特性,建議購買細胞的時候,同時購買 ATCC 的培養基(見產品信息說明書和 ATCC 網站)。
  收到細胞后為什么沒有說明書?
  為了響應環保號召,以及保證信息的快速更新。ATCC 細胞株寄送時沒有隨貨附帶紙質版說明書。
  ATCC細胞系說明書有關于細胞復蘇和傳代的詳細步驟。除說明書外,還有另外一份重要文件——COA(Certificate of Analysis)。COA 中包含具體批次信息,如每管細胞的數量,建議復蘇使用的培養基用量,已知細胞的傳代代次等重要信息。


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