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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 生物产业,制药/生物制药 |
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产品介绍
产品详情
产品介绍
本产品是大肠杆菌重组表达来源的噬菌体 T7 RNA 聚合酶，是对野生型T7进行了改造优化，突变得到的可以大幅度降低dsRNA含量的T7 RNA 聚合酶。以含有 T7 启动子序列的双链 DNA 为模板，以 NTP 为底物，合成与启动子下游的反向单链 DNA 互补的RNA。双链线性平末端或 5’突出末端 DNA均可作为 T7 RNA 聚合酶的底物模板，因此线性质粒、PCR 产物均可用作体外合成 RNA 的模板。
本产品按照GMP规定生产，以液体形式提供。
产品特色
1. 高效低dsRNA合成
dsRNA含量显著降低：与传统T7 RNA聚合酶相比，dsRNA含量降低了至少10倍以上，有效避免了dsRNA引发的免疫激活和对mRNA功能的干扰。
高产量：mRNA产量稳定在9mg/mL以上，满足大规模生产的需要。
高完整度：转录产物的完整度不低于野生型T7 RNA聚合酶，确保mRNA的质量和功能。
2. 高效加帽与低投入
高加帽率：片段加帽率均超过99%，确保mRNA的稳定性和翻译效率。
低Cap analog投入量：在不同片段长度下，Cap analog投入量降低至2.5mM，仍能实现优异的加帽率，显著降低了生产成本。
3. 优化的筛选与验证
双重筛选策略：通过构建随机文库与FADS高通量筛选方法，以及半理性设计与微孔板技术，筛选出超过10^6的随机突变文库，最终选出一款性能的突变体进行商品化应用。
产品特性：
| 来源 | 重组 E. coli |
| 最适温度 | 37℃ |
| 活性 | 250 U/μL |
| 宿主核酸残留 | <10 fg/U |
| 宿主蛋白残留 | <50 ppm |
| RNA 酶残留 | 阴性 |
| 储存缓冲液 | 50mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100，50%（v/v）甘油，pH7.9@25℃ |
| 活性单位定义 | 在 37℃、pH8.0 的条件下，1 h 内使 1 nmol 的 [3H] GMP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为一个活性单位。 |
应用案例
1、 在不同长度的应用场景下，均能显著性降低dsRNA 含量
| 片段长度 | T7 RNA pol | 产量（mg/mL） | 完整度（%） | dsRNA含量（(1ug RNA产生 ng的dsRNA) |
| 4K | T7-WT | 12.4 | 88.3 | 0.4273 |
| T7-低dsRNA | 12.1 | 89.9 | 0.0129 | |
| 竞品A | 11.0 | 87.8 | 0.0323 | |
| 9K | T7-WT | 9.5 | 81.9 | 2.9180 |
| T7-低dsRNA | 9.0 | 82.0 | 0.0379 | |
| 竞品A | 7.2 | 78.7 | 0.1805 |
2、Cap analog的投入量可以大幅降低
| Cap analog投入量（mM） | 加帽率（%）-4K | 1K | |
| WT | mutant | WT | |
| 10 | 100 | 100 | 100 |
| 5 | 100 | 100 | 100 |
| 2.5 | 100 | 100 | 99.7 |
在不同的片段长度，Cap analog的投入量降低到2.5mM， 仍能得到优异的加帽率。同时在细胞层面上，也能得到优异的表现（见下图）
存储条件
-25 ~ -15℃保存，有效期1年。
