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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 生物产业,制药/生物制药 |
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产品介绍
产品详情
产品介绍
本产品是大肠杆菌重组表达来源的噬菌体 T7 RNA 聚合酶，是对野生型T7进行了改造优化，突变得到的可以大幅度降低dsRNA含量的T7 RNA 聚合酶。以含有 T7 启动子序列的双链 DNA 为模板，以 NTP 为底物，合成与启动子下游的反向单链 DNA 互补的RNA。双链线性平末端或 5’突出末端 DNA均可作为 T7 RNA 聚合酶的底物模板，因此线性质粒、PCR 产物均可用作体外合成 RNA 的模板。
产品特色
1. 高效低dsRNA合成
dsRNA含量显著降低：与传统T7 RNA聚合酶相比，dsRNA含量降低了至少10倍以上，有效避免了dsRNA引发的免疫激活和对mRNA功能的干扰。
高产量：mRNA产量稳定在9mg/mL以上，满足大规模生产的需要。
高完整度：转录产物的完整度不低于野生型T7 RNA聚合酶，确保mRNA的质量和功能。
2. 高效加帽与低投入
高加帽率：片段加帽率均超过99%，确保mRNA的稳定性和翻译效率。
低Cap analog投入量：在不同片段长度下，Cap analog投入量降低至2.5mM，仍能实现优异的加帽率，显著降低了生产成本。
3. 优化的筛选与验证
双重筛选策略：通过构建随机文库与FADS高通量筛选方法，以及半理性设计与微孔板技术，筛选出超过10^6的随机突变文库，最终选出一款性能的突变体进行商品化应用。
产品特性：
| 来源 | 重组 E. coli |
| 最适温度 | 37℃ |
| 活性 | 250 U/μL |
| 宿主核酸残留 | <10 fg/U |
| 宿主蛋白残留 | <50 ppm |
| RNA 酶残留 | 阴性 |
| 储存缓冲液 | 50mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100，50%（v/v）甘油，pH7.9@25℃ |
| 活性单位定义 | 在 37℃、pH8.0 的条件下，1 h 内使 1 nmol 的 [3H] GMP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为一个活性单位。 |
应用案例
1、 在不同长度的应用场景下，dsRNA无论跟WT T7 ，还是竞品，在保证其他指标不降的前提下，dsRNA 均有极显著下降。
| 片段长度 | T7 RNA pol | 产量（mg/mL） | 完整度（%） | dsRNA含量（(1ug RNA产生 ng的dsRNA) |
| 4K | T7-WT | 12.4 | 88.3 | 0.4273 |
| T7-低dsRNA | 12.1 | 89.9 | 0.0129 | |
| 竞品A | 11.0 | 87.8 | 0.0323 | |
| 9K | T7-WT | 9.5 | 81.9 | 2.9180 |
| T7-低dsRNA | 9.0 | 82.0 | 0.0379 | |
| 竞品A | 7.2 | 78.7 | 0.1805 |
2、降低Cap analog的投入量，在不同的片段长度，以及与WT的对比下，投入量降低到2.5mM， 仍能得到优异的加帽率。同时在细胞层面上，也能得到优异的表现。
| Cap analog投入量（mM） | 加帽率（%）-4K | 1K | |
| WT | mutant | WT | |
| 10 | 100 | 100 | 100 |
| 5 | 100 | 100 | 100 |
| 2.5 | 100 | 100 | 99.7 |
存储条件
-25 ~ -15℃保存，有效期1年。
