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HB180514

Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads (50 bp以上)

产品信息

产品描述

Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads针对AMPure XP磁珠对长度低于200 bp的小片段DNA回收效果不佳而专门设计。本产品基于SPRI（Solid Phase Reverse Immobilization）原理制备，采用超顺型磁珠，配合*的缓冲体系，提供了一种简单、快速、高效的DNA回收方法。本产品可特异性吸附DNA，回收低至50 bp的DNA-片段，并有效去除引物二聚体、dNTP、无机盐及蛋白质等杂质，得到高质量的DNA回收产物。

· 适用范围广：50 bp-20 kb DNA-片段；

· 回收率高：高达85%以上；

· 纯化力好：DNA产物A_260/280=1.8-2.0；

· 操作简便：30 min内完成整个操作流程，无需反复离心；

· 应用多样：PCR产物纯化、酶切产物纯化、cfDNA回收、NGS建库产物回收；

· 产物下游应用：酶切、连接、克隆、NGS建库等。

运输与保存方法

冰袋运输。2-8℃保存，效期一年。避免冷冻！

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）磁珠使用前须在室温平衡至少30 min。

3）80%乙醇需现用现配，否则将影响回收效率。

4）进行长度分选时，初始样品体积需≥100 μL，不足时请用超纯水补齐。样品体积太小，将导致移液误差增大，进而影响分选的准确性。

使用方法

1. 操作流程

图1 Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads操作流程

2. 操作步骤

1）将磁珠由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。配制80%乙醇。

2）涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

3）按下表吸取不同比例的Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads至DNA溶液中，室温孵育5 min。

表1磁珠DNA-片段回收推荐比例

注：表中“×”表示样品DNA体积。如需回收≥50 bp的DNA-片段，样品DNA体积为100 mL，则磁珠使用体积为2.2×100 mL=220 mL。

4）将PCR管短暂离心并置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约5 min），小心移除上清。【注意：勿吸取磁珠。】

5）保持PCR管始终置于磁力架中，加入200 μL新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育30 sec后，小心移除上清。

6）重复步骤5，总计漂洗2次。

7）保持PCR管始终置于磁力架中，开盖空气干燥磁珠至刚刚出现龟裂（约5 min）。【注意：切记磁珠不要干燥时间太久，磁珠干燥过度将影响纯化效果?！?/span>

8）将PCR管从磁力架中取出，加入21 μL ddH₂O (≥20 μL)，涡旋振荡或使用移液器轻轻吹打至充分混匀，室温静置5 min。

9）将PCR管短暂离心并置于磁力架中静置，待溶液澄清后（约5 min），小心移取20 μL上清至新PCR管中，勿触碰磁珠。

10）检测DNA浓度与纯化效果。

3. 纯化示例

Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads相对AMPure XP磁珠，回收DNA效果更好。

图2 不同比例磁珠纯化DNA电泳图