国产日产欧美精品-亚洲国产综合久久精品-色综合色国产热无码一-亚洲欧美日本国产,免费观看一区二区三区_在线观看片A免费不卡观看_亚洲а∨天堂久久精品_99久无码中文字幕一本久道

翌圣生物科技(上海)股份有限公司

初級(jí)會(huì)員·13年

聯(lián)系電話

400-6111-883

您現(xiàn)在的位置: 翌圣生物科技(上海)股份有限公司>>蛋白與免疫>>蛋白抽提>> 20101ESRIPA裂解液(強(qiáng))RIPA Lysis Buffer
20101ESRIPA裂解液(強(qiáng))RIPA Lysis Buffer
參考價(jià): 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 20101ES 產(chǎn)品型號(hào)
  • 其他品牌 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):1547更新時(shí)間:2024-07-26 10:42:17

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
初級(jí)會(huì)員·13年
聯(lián)人:
曹女士
話:
400-6111-883
機(jī):
后:
4006-111-883
真:
86-21-34615995
址:
上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓
網(wǎng)址:
www.yeasen.com

掃一掃訪問手機(jī)商鋪

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 現(xiàn)貨 貨號(hào) 20101ES
應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
RIPA裂解液(強(qiáng))RIPA Lysis Buffer,其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液,對(duì)動(dòng)物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可用于常規(guī)的Western、IP等實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品介紹

RIPA裂解液(強(qiáng))RIPA Lysis Buffer

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

儲(chǔ)存

價(jià)格(元)

RIPA裂解液(強(qiáng))RIPA Lysis Buffer

20101ES60

100ml

-20

230

產(chǎn)品描述

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液,對(duì)動(dòng)物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可用于常規(guī)的Western、IP等實(shí)驗(yàn)。

RIPA裂解液的主要成分為50mM Tris (pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-1001% sodium deoxycholate,0.1% SDS,并含有sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多種抑制劑,可以有效抑制蛋白降解。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋(wet ice)運(yùn)輸。

-20保存,一年有效。盡量避免反復(fù)凍融,建議分裝后使用。

注意事項(xiàng)

1)需自備PMSF

2)裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4進(jìn)行。

3)用RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品,可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定其蛋白濃度(YEASEN CAT NO.20201ES76)。由于含有較高濃度的去垢劑,不能用Bradford法測(cè)定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。

4)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明:

() 培養(yǎng)細(xì)胞樣品:

1. 融解RIPA裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的zui終濃度為1mM。

2. 貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。

懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

3. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

裂解液用量說明:通常6孔板每孔細(xì)胞加入150μl裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到200μl250μl。

(二)組織樣品:

1. 把組織|剪切成細(xì)小的碎片。


2. 融解RIPA裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的zui終濃度為1mM。

3. 按照每20mg組織加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)

4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

5. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

注:RIPA裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物,屬正?,F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見的轉(zhuǎn)錄因子,例如NF-kappaB、p53等時(shí),通常不必進(jìn)行超聲處理,就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。  





會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
產(chǎn)品對(duì)比 二維碼

掃一掃訪問手機(jī)商鋪

對(duì)比框

在線留言
鲜城| 镇坪县| 昂仁县| 兴义市| 蓬溪县| 西藏| 潜江市| 佳木斯市| 射阳县| 永春县| 红安县| 达日县| 肥城市| 横山县| 阳春市| 忻州市| 大荔县| 衡南县| 文山县| 大宁县| 津南区| 原平市| 长丰县| 铜山县| 哈巴河县| 张家口市| 南康市| 吉林省| 承德县| 胶南市| 库车县| 辰溪县| 甘泉县| 安塞县| 天镇县| 延寿县| 高碑店市| 鲁甸县| 泰来县| 简阳市| 新津县|