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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 25KU |
|---|---|---|---|
| 货号 | 20157ES25 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业 |
产品介绍
UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格（元） |
UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶 | 20157ES25 | 25 KU | -20℃ | 1125.00 |
20157ES50 | 50 KU | -20℃ | 1965.00 | |
20157ES60 | 100 KU | -20℃ | 3245.00 | |
20157ES80 | 1 MU (1000 KU) | -20℃ | 27585.00 | |
20157ES90 | 5 MU (5000 KU) | -20℃ | 118655.00 |
产品描述
UltraNuclease（全能核酸酶），又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶；是一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶，可在链内任意核苷酸间进行切割，将核酸*消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸，能够在非常广泛的条件下（6 M Urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4% Triton X100，0.1% SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF）降解各种形式的（双链，单链，线状，环状，天然或变性）DNA和RNA，广泛用于去除生物制品中的核酸。
本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化并在GMP环境下制备，不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度，提高蛋白纯化效率及功能研究；还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂，将宿主残留核酸降至皮克（pg）级别从而提高生物制品功效和安全性；并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞（PBMC）的结团。
本品以无菌液体酶的形式提供，储存于缓冲液（20 mM Tris-HCl pH 8.0，2 mM MgCl2，20 mM NaCl，50%甘油）中，无色透明液体。
产品性质
来源 | E. coli |
生产管理标准 | ISO9001/GMP |
分子量（Molecular Weight） | 26.5 kDa |
等电点 | 6.85 |
纯度（Purity） | ≥ 99%（SDS-PAGE） |
酶活（Enzyme Activity） | ≥ 250 U/μL |
比活（Specific Activity） | ≥ 1.5×106 U/mg蛋白 |
最适pH（Optimum pH） | 8.0（工作范围pH 6-10） |
最适温度（Optimum Temperature） | 37℃（工作范围0-42℃） |
辅助因子（Cofactor） | 1-10 mM Mg2+ |
蛋白酶活性（Protease） | Undetected |
无菌检查（Sterility） | Undetected |
内毒素（Endotoxin） | < 0.25EU/1000U |
宿主蛋白残留（Host protein） | < 10ppm（μg/mL） |
储存缓冲液（Storage Buffer） | 20 mM Tris-HCl pH8.0，2 mM MgCl2，20 mM NaCl，50%甘油 |
活性单位定义（Unit Definition） | 在37℃，pH 8.0反应条件下，2.625 mL反应体系中，在30 min内使△A260吸收值变化1.0（相当于*消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸）所用的酶量定义为一个活性单位（U）。 |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。若是打开包装后并4℃放置超过一周，建议过滤除菌防止微生物污染。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
推荐使用条件
条件参数 | 最///佳条件 | 有效条件 |
Mg2+ | 1-2 mM | 1-10 mM |
pH | 8-9 | 6-10 |
温度 | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100 mM | >0 mM |
巯基乙醇 | 0-100 mM | >0 mM |
单价阳离子 | 0-20 mM | 0-150 mM |
磷酸根离子 | 0-10 mM | 0-100 mM |
推荐使用量及处理时间
UltraNuclease用量（终浓度） | 处理时间 |
0.25 U/mL | > 1 h |
2.5 U/mL | 15 min |
25 U/mL | 2 min |
使用方法
样本准备
贴壁细胞：去除培养基，用PBS清洗细胞，去除上清。
悬浮细胞：离心收集细胞，用PBS清洗细胞，6,000 rpm 离心10 min，收集沉淀。
大肠杆菌：离心收集菌体，用PBS清洗1次，8,000 rpm 离心5 min，收集沉淀。
2、样品处理
将收集到的细胞沉淀按照质量（g）与体积（mL）比1：(10~20) 的比例进行裂解处理，也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞（1 g细胞约为109个）。
3、酶的添加
按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加UltraNuclease，也可以跟据上表中的推荐使用量自行选定添加方案，在一定范围内增加酶量，消化所需时间相应减少。
4、上清获取
以12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清，再进行后续相关实验。
【注】若溶液为高盐溶液，偏酸性或者偏碱性，含有较高浓度的去垢剂、变性剂，应适当增加酶的用量或延长孵育时间。
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产品名称 | 货号 | 规格 |
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20125ES60 | 100 KU |
HB210326
