DNA/RNA Kit for Virus Detection

检测用病毒he酸（DNA/RNA）提取试剂盒

检测用病毒he酸DNA/RNA快速提取试剂盒

目录号：91517

产品内容

自备试剂

无水乙醇

保存条件

Poly Carrier 置于-20℃保存，其他组分置于室温（15 ~ 25℃）保存。

产品简介

本试剂盒适用于动物组织、血浆、血清、淋巴液、培养上清、分泌物、拭子、粪便、牛奶、尿液等样品中病毒核酸的提取，可同时提取样本中的DNA 和 RNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司te有新型材料，配合本公司du特的裂解液配方可以可最大限度的回收高纯度病毒核酸。提取的病毒 RNA/DNA 纯度高，质量稳定可靠，可直接适用于 PCR、RT-qPCR分析。

产品特点

1. 节省时间，简捷，单个样品操作一般可在 20 min 内完成;

2. 应用广泛：可提取多种不同的液体样本。

注意事项

1. Poly Carrier：

如果起始处理量很少，我们推荐使用 Poly Carrier，如果预期有较大量

核酸产量，用户可以根据需要选择是否加入 Poly Carrier。

2. Poly Carrier 的使用方法：在每个样品提取所需裂解液 VLB 中加入 4 μl Poly Carrier，将裂解液 VLB 与 Poly Carrier 溶液充分颠倒混匀即可(裂解液 VLB 容易起泡沫，请勿使用涡旋振荡混匀)。也可根据样品数量，在总共需要的裂解液 VLB 中加入总共需要的 Poly Carrier 混匀备用?；旌弦涸谑椅?24 小时内稳定。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

操作步骤

提示：

第一次使用前，请先在漂洗液 RW 瓶中加入无水乙醇，请参照瓶上的标签。

操作前，请将样品平衡至室温。

所有离心步骤均需要在室温下进行。

1. 无细胞体液（例如：血浆/血清/淋巴液/无细胞体液/细胞培养上清液/尿液）：

a. 200μl 血清等体液（需回复到室温，不足可用 0.9% NaCl 或者 PBS补足）转入 1.5ml 离心管，加入 400μl 裂解液 VLB， 立刻涡旋振荡 15 sec 充分混匀。

b. 室温(15-25℃)放置 10 min。

c. 加入 450μl 无水乙醇，立刻涡旋振荡 15 sec 充分混匀。

注意：如果周围环境高 30℃，乙醇需要再在冰上预冷后再加入。

d. 立刻接操作步骤的步骤 5。

2. 粪便样品：

a. 取 500μl 0.5-1 ml 粪便样本悬浮于 5 ml 生理盐水中，che底涡旋振荡混匀后，4,000×g (6,000 rpm)离心20min后取上清200μl 转入 1.5ml离心管，加入400μl 裂解液VLB， 立刻涡旋振荡15sec 充分混匀。

b. 室温(15-25℃)放置 10 min。

c. 加入 450μl 无水乙醇，立刻涡旋振荡 15 sec 充分混匀。

d. 立刻接操作步骤的步骤 5。

3. bi拭子/yan拭子：

a. 理盐水或病毒运输液che底颠倒或涡旋振荡混匀后取 200 μl 转入1.5 ml 离心管，加入 400 μl 裂解液 VLB， 立刻涡旋振荡 15 sec充分混匀。

b. 室温 (15-25℃) 放置 10 min。

c. 加入 450 μl 无水乙醇，立刻涡旋振荡 15 sec 充分混匀。

d. 立刻接操作步骤的步骤 5。

4. 组织样本（气管、肺、喉头、脾脏、扁桃体、法氏囊、肾脏和淋巴结等）:

a. 变明显的组织块剪取样品约 20 mg（备注：A.可选择多部位剪碎混匀后再取。B.一粒大米重约 20 mg。C.请勿使用过量组织，影响提取效果），依次加入 150 μl 裂解液 VLB、450 μl 实验室纯水或者去离子水（不用灭菌）和 20μl 蛋白酶 K，用眼科剪反复多次剪

碎混匀或用电动匀浆器匀浆，置 56℃水浴中消化 15-30 min（视消化情况）后瞬时离心取上清。

b. 将上述处理后样本离心取上清 100 μl 转入 1.5 ml 离心管，加入300 μl 裂解液 VLB，立刻涡旋振荡充分混匀。

c. 加入 250 μl 无水乙醇，立刻涡旋振荡 15 sec 充分混匀。

d. 立刻接操作步骤的步骤 5。

5. 每次转移≤750 μl 上清混合液（包括沉淀）至 RNA 吸附柱中，12,000 rpm 离心 1 min，倒弃滤液。吸重复此过程，直到溶液全部上柱。

6. 向吸附柱内加入 500 μl 去蛋白液 RE，12,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液。

7. 向吸附柱内加入 500 μl 漂洗液 RW，12,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液。 

（注意：漂洗液 RW 中按要求加入无水乙醇，用后立即盖紧瓶盖，以防乙醇挥发）

8. 可选步骤：重复步骤 6 一次。

9. 将 RNA 吸附柱放回空收集管中，12,000 rpm 离心 2min，甩干膜上残留的乙醇。

10. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管中，加入 30 ~ 50 ul 的RNase-Free ddH2O 洗脱，室温放置 1 min。12,000 rpm 离心 1 min，管底即 RNA 溶液。

（注意：如要提高 RNA 浓度，可将得到的溶液重新加到吸附柱中，室温放置 1 min，

再次离心收集）

11. 病毒 DNA 可以存放在 2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在-20℃。病毒 RNA 建议最好立刻使用，否则立刻短期放置在-70℃备用。

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