BD Phosflow裂解/固定缓冲液（5X）558049，BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer 5X

用途
本产品用于全血裂解与固定，适用于细胞内流式细胞术分析。例如，在使用激酶激活剂（如佛波酯）刺激细胞后，BD Phosflow™ 裂解/固定缓冲液可一步完成红细胞裂解与白细胞固定，使研究者能够快速灭活激酶、磷酸酶和/或蛋白酶，从而检测细胞内的真实磷酸化状态。

特性

• 经测试可保留细胞的光散射特性

• 适用于人源及小鼠全血样本

• 在淋巴细胞亚群分析中，全血裂解效果与密度梯度离心法分离PBMCs相当

兼容性说明
多数情况下，磷酸化特异性抗体可与细胞表面标志物（如CD标志物）同步染色。但请注意，并非所有表面标志物均与本产品兼容。

BD Phosflow裂解/固定缓冲液（5X）558049，BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer 5X

推荐的实验流程

流式细胞术操作步骤

样本处理

1. 使用EDTA或肝素抗凝管采集正常人外周血，根据实验需求加入相应激活剂处理。

工作液配制
2. 将BD Phosflow™裂解/固定缓冲液(5X浓缩液)按1:5比例用去离子水/蒸馏水(室温)稀释为1X工作液，37°C预热。工作液需现配现用，实验剩余溶液应弃置。

裂解固定
3. 按1:20比例(血样:工作液)混合抗凝血与预热的1X工作液，强力颠倒混匀8-10次，37°C水浴孵育10分钟。

细胞洗涤
4. 500×g离心8分钟，弃上清，用Hank's solution洗涤细胞一次。

透膜处理
5. 涡旋重悬细胞，边震荡边缓慢加入透膜试剂(如预冷的BD Phosflow™ Perm Buffer II)，冰上孵育30分钟后离心。

抗体标记
6. 洗涤细胞两次，用BD Pharmingen™ Staining Buffer染色缓冲液重悬。
7. 加入相应抗体室温避光染色30-60分钟，洗涤后准备上机检测。