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P67996 pLV3-CMV-NES-PhoCl2c-mCherry-Puro

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专注细胞,载体质粒,耐药株,慢病毒(过表达,干扰)包装、稳转株构建,基因敲除、敲入等实验服务 

载体 细胞 载体构建 稳转细胞株 病毒包装

供货周期 两周 规格
货号 P67996 应用领域 医疗卫生,生物产业,制药/生物制药
主要用途 仅供科研

名称pLV3-CMV-NES-PhoCl2c-mCherry-Puro
别称-
基因长1542bp
质粒宿主哺乳细胞,慢病毒
质粒用途蛋白表达
片段类型ORF
原核抗性Amp
筛选标记Puro
荧光标记红色
启动子CMV
复制子pUC
感受态Stbl3
温度37度
背景载体pLV3-CMV-MCS-Puro
正向引物CMV-F



注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。


1
、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0  1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min;

2
、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3
、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;

4
、42热激90s,再冰浴2min;

5
、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;

6
6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7
、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8
、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;

9
、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒




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