NBS0213 EZ poly™S转染试剂
- 公司名称 上海诺宁生物科技有限公司
- 品牌 NoninBio
- 型号 NBS0213
- 产地
- 厂商性质 经销商
- 更新时间 2023/12/14 20:28:30
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供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
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EZ poly™S转染试剂
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
NBS0213-0.5ml | EZ poly™S转染试剂 | 0.5ml |
NBS0213-1ml | EZ poly™S转染试剂 | 1ml |
NBS0213-5ml | EZ poly™S转染试剂 | 5x1ml |
产品简介:
EZ poly™S转染试剂是一款专用于悬浮细胞转染的DNA转染试剂,可用于质粒DNA在悬浮生长细胞中的传送。它适用于大规模蛋白生产,及工业化生产中的真核细胞转染。具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
应用范围:
EZ poly™S转染试剂特别适用于293F和CHO-S等悬浮细胞的转染。在有血清和无血清的条件下,均可得到较高的转染效率,且重复性好。在大规模蛋白生产中,操作简单、蛋白表达量高、细胞毒性低、细胞通用性好。
保存条件:
2-8℃保存一年
运输:
常温运输
质粒DNA的转染:
以100mL培养瓶为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1 | 细胞接种: 0.2~0.5×106/mL个细胞,接种于20mL培养基中。在37℃,120rpm,5%CO2的条件下培养。 |
2 | 质粒稀释: 将10 µg质粒稀释于Opti-MEM培养基中,终体积25 µL。 |
3 | 复合物制备: 按比例取适量EZ poly™S转染试剂稀释于Opti-MEM培养基中,终体积25 µL,室温孵育5分钟后与质粒稀释液混匀。 |
4 | 室温静止20分钟 |
5 | 每孔50µL复合物加入细胞培养板中,混匀,37℃培养48~72小时后检测基因表达,无需更换培养基。 |
质粒DNA的转染优化:
可通过改变细胞密度、 DNA浓度以及EZ poly™S浓度对转染进行优化。EZ poly™S (µL): DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。转染大于48h后,可通过适量添加培养基的方式延长转染时间。
表1. 不同培养瓶所需转染试剂和DNA的用量
培养瓶 | 细胞数量 | 接种 培养基 | Opti-MEM 稀释后终体积 | DNA转染 | |
试剂用量 | DNA | ||||
50mL | 0.5×106/mL | 10mL | 2×25µL | 12.5µL | 5µg |
100mL | 0.5×106/mL | 20mL | 2×50µL | 25µL | 10µg |
250mL | 0.5×106/mL | 50mL | 2×100µL | 50µL | 20µg |
500mL | 0.5×106/mL | 100mL | 2×200µL | 100µL | 50µg |
1L | 0.5×106/mL | 200mL | 2×1mL | 200µL | 100µg |
5L | 0.5×106/mL | 1L | 2×2mL | 1mL | 500µg |