2021年9月3日，GB 23200.121-2021《植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱联用法》正式实施。该标准适用于植物源性食品中331种农药及其44个代谢物(共计375种组分)残留量的测定，是国内首个单针测定农药残留品种最多的LC-MS/MS国标，采用GB2763标准检测方法，权威性更强，涉及数量多，种类繁，既涉及到剧毒禁用有机磷及氨基甲酸酯类农药，又涉及到常用农药品种如三唑类杀菌剂及苯甲酰脲类杀虫剂，覆盖范围广，同时涉及食用菌、水果、蔬菜、糖料、粮食、油料作物、茶叶、坚果和香辛料、植物油类12大类农产品，全面覆盖植物源性食品。
////
珀金埃尔默公司参照GB 23200.121-2021标准，建立了完善的分析方法及相应的整体解决方案，可直接进行方法的转移，无需进行方法开发，大大提高分析效率，同时可获得优异的灵敏度，完全满足实验室的分析要求。
样品处理
蔬菜和水果的取样量按照相关标准的规定执行，食用菌样品随机取样1 kg。样品取样部位按照GB 2763的规定执行。对于个体较小的样品，取样后全部处理；对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理；对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位切取小片或截成小段后处理；取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆，放入聚乙烯瓶中。
取谷类样品500 g，粉碎后使其全部可通过425 μm的标准网筛，放入聚乙烯瓶或袋中。取油料、茶叶、坚果和香辛料各500 g，粉碎后充分混匀，放入聚乙烯瓶或袋中。
植物油类搅拌均匀，放入聚乙烯瓶中。
样品贮存
将试样按照测试和备用分别存放。于-18°C条件下保存。
样品处理
蔬菜、水果、食用菌和糖料
称取10 g试样 (精确至0.01 g)于50 mL塑料离心管中，加入10 mL乙腈、4 g硫酸镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠、0.5 g柠檬酸氢二钠及1颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，剧烈震荡1 min后4200r/min离心5 min。吸取一定量上清液至内含除水剂和净化材料的塑料离心管中(每毫升提取液使用150 mg无水硫酸镁、25 mg PSA)；对于颜色较深的试样，离心管中另加入GCB(每毫升提取液使用2.5 mg)，涡旋混匀1 min。4200 r/min离心5 min，吸取上清液过微孔滤膜，用于测定。
谷物、油料和坚果
称取5 g试样(精确至0.01g)于50 mL塑料离心管中，加10 mL水涡旋混匀，静置30 min。加入15 mL乙腈-醋酸溶液、6 g无水硫酸镁、1.5 g醋酸钠及1颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，剧烈震荡1 min后4200 r/min离心5 min。吸取一定量上清液至内含除水剂和净化材料的塑料离心管中(每毫升提取液使用150 mg无水硫酸镁、50 mg C18和50 mgPSA)，涡旋混匀1 min。4200 r/min离心5 min，吸取上清液过微孔滤膜，用于测定。
茶叶和香辛料
称取2 g试样 (精确至0.01 g)于50 mL塑料离心管中，加10 mL水涡旋混匀，静置30 min。加入15 mL乙腈-醋酸溶液、6 g无水硫酸镁、1.5 g醋酸钠及1颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，剧烈震荡1 min后4200 r/min离心5 min。吸取一定量上清液至内含除水剂和净化材料的塑料离心管中(每毫升提取液使用150 mg无水硫酸镁、50 mg C18、50 mgPSA和25 mg GCB)，涡旋混匀1 min，4200 r/min离心5 min，吸取上清液过微孔滤膜，用于测定。
植物油
称取2 g试样 (精确至0.01 g)于50 mL塑料离心管中，加入5 mL水。加入10 mL乙腈、4 g硫酸镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠、0.5 g柠檬酸氢二钠及1颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，剧烈震荡1 min后4200 r/min离心5 min，吸取一定量上清液至内含除水剂和净化材料的塑料离心管中 (每毫升提取液使用150 mg无水硫酸镁、50 mg C18和50 mgPSA)，涡旋混匀1 min。4200 r/min离心5 min，吸取上清液过微孔滤膜，用于测定。（注：测定磺酰脲类除草剂、环己烯酮类除草剂 (烯草酮、烯草酮砜、烯草酮亚砜、噻草酮、三甲苯草酮、烯禾啶)、三唑并嘧啶磺酰胺类除草剂(双氟磺草胺、唑嘧磺草胺、五氟磺草胺)、氟啶胺、螺虫乙酯及其代谢物、甲磺草胺、苯嘧磺草胺、苯噻隆、氰霜唑代谢物CCIM和导噁唑草酮-二酮腈时，PSA的用量降低至每毫升提取液5 mg(蔬菜、水果、食用菌、糖料、植物油)和10 mg(谷物、油料、坚果)。
珀金埃尔默LX50 UHPLC参数
色谱柱：Brownlee SPP C18 100x2.1 mm，2.7 μm(货号：N9308404)
柱温：40°C
流速：0.3 mL/min
进样量：2 μL
表1.375种农残类化合物的液相色谱梯度洗脱表
质谱参数
仪器采用珀金埃尔默QSight 210三重四极杆质谱仪，离子源参数及目标化合物质谱参数见表2和表3(见附件)。
表2.质谱离子源参数
本方法采用一针进样，通过Time Managed MRM正负切换模式同时测定331种化合物及其45种代谢物，共375个化合物，其中365种化合物采用正离子模式采集，10种化合物采用负离子模式采集。图1中展示了375种化合物的提取离子叠加谱图，图2中是单独10个负离子化合物的提取离子色谱图。经过优化色谱洗脱条件，图3展示了不同保留时间的部分农药化合物的提取离子色谱图。各个化合物峰型对称，软件中Timed MRM功能自动完成375个化合物的驻留时间分配，保证每个色谱峰上有足够的采集点数，以便获得准确的结果及优异的重复性，不同流出时间的代表性化合物的色谱图采集点数情况示例详见图4。
向下滑动查看图1-4全部内容
采用以上3.1前处理步骤，处理阴性苹果样品作为空白基质，稀释375种化合物的混合标准溶液，制成2ng/mL-200 ng/mL 的系列校准标准溶液，并绘制标准曲线，采用外标法进行定量分析。图5为随机挑选的不同流出时间的化合物的标准曲线情况。其中全部化合物在线性范围内，线性关系均较好，相关系数R2均大于0.995。
图5.部分代表性化合物在苹果基质中的标准曲线情况（点击查看大图）
参考文献
GB 23200.121-2021《植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱联用法》
附件
表3.375种农残类化合物质谱参数列表
向下滑动查看表3全部内容
关注我们
欢迎点击阅读原文提交需求
17
立即询价
您提交后，专属客服将第一时间为您服务