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北京诺博莱德科技有限公司
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当前位置:北京诺博莱德科技有限公司>>生化试剂>>氧化磷酸化系列>> BL6004Na++K++-ATP酶检测试剂盒 氧化磷酸化系列

Na++K++-ATP酶检测试剂盒 氧化磷酸化系列

参  考  价面议
具体成交价以合同协议为准

产品型号BL6004

品       牌NobleRyder/诺博莱德

厂商性质经销商

所  在  地北京市

更新时间:2025-07-17 16:26:27浏览次数:145次

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供货周期 现货 规格 100T/48S
货号 BL6004 应用领域 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药
主要用途 广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP 水解生成ADP 和无机磷。
Na+K+- ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP 水解生成ADP 和无机磷。
Na++K++-ATP酶检测试剂盒 氧化磷酸化系列


Na+K+- ATP 酶活性测定说明书

微量法 100 /48 

 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:

Na+K+- ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP 水解生成ADP 和无机磷。

测定原理:

Na+K+-ATP 酶分解ATP 生成ADP 及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP 酶活性。


Na++K++-ATP酶检测试剂盒  氧化磷酸化系列

试剂的组成和配制:

产品名称

BL6004-100T/48S

Storage

提取液:液体

100ml

4℃

试剂一:液体

10ml

4℃

试剂二:粉剂

1

-20℃

试剂三:液体

2ml

4℃

试剂四:粉剂

1

4℃

试剂五:粉剂

1

4℃

试剂六:粉剂

1

4℃

试剂七:液体

25ml

室温

试剂八:10mmol/L 标准磷贮备

10ml

4℃

说明书

一份

 

试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 6ml 蒸馏水充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存。用时加入 3mL 蒸馏水, 4℃保存。

试剂五:粉剂×1 , 4℃保存。用时加入 25ml 蒸馏水,溶解后 4℃保存一周;试剂六:粉剂×1 , 4℃保存。用时加入 25ml 蒸馏水,溶解后 4℃保存一周;

0.5μmol/ml 标准磷应用液配制:将试剂八 20 倍稀释,即取 0.1ml 试剂八加 1.9ml 蒸馏水充分混匀;定磷剂的配制 H2O: 试剂五:试剂六:试剂七=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。

注意:配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。


具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准


需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

样品酶液的制备:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(ml 500~10001 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1ml 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml) 15~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1ml 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

操作步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 660nm,蒸馏水调零。

2、酶促反应(EP 管中加入下列试剂):


对照管

测定管

试剂一μl

65

45

试剂二μl

60

60

试剂三μl


20

样本 μl


100

混匀,37℃(哺乳动物) 25℃(其他物种)准确水浴 10min

试剂四μl

25

25

样本 μl

100


混匀,8000g,25℃离心 10min,取上清液 3、定磷(EP 管或 96 孔板中加入下列试剂)


空白管

标准管

对照管

测定管

0.5μmol/ml 标准磷应用液

μl


20



上清液μl



20

20

蒸馏水μl

20




定磷试剂μl

200

200

200

200

混匀,室温放置 30min,在 660nm 处,记录各管吸光值。

注意:

1、由于每一个样都必须做对照,本试剂盒 100 管保证测 48 Na+K+-ATP 酶。

2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。

3、空白管和标准管只要做一管。

计算:

1、血清(浆)Na+K+- ATPase 活力的计算:

定义:每小时每毫升血清(浆) Na+K+- ATP 酶分解ATP 产生 1μmol 无机磷的量为一个酶活力单位。

Na+K+-ATP 酶活力(μmol/h/ml=[C 标准管×V A 测定管-A 对照管)÷A 标准管-A 空白管÷V ÷T=7.5×A 测定管-A 对照管)÷A 标准管-A 空白管

2、组织、细菌或细胞中Na+K+- ATPase 活力的计算:

(1) 按蛋白浓度计算:

定义:每小时每毫克组织蛋白中 Na+K+- ATP 酶分解ATP 产生 1μmol 无机磷的量为一个酶活力单位。

Na+K+-ATP 酶活力(μmol/h /mg prot)=[C 标准管×V A 测定管-A 对照管)÷A 标准管-A 空白管÷Cpr×V 样)÷T =7.5×A 测定管-A 对照管)÷A 标准管-A 空白管÷Cpr

(2) 按样本鲜重计算:

定义:每小时每克组织中Na+K+-ATP 酶分解ATP 产生 1μmol 无机磷的量为一个酶活力单位。

Na+K+-ATP 酶活力(μmol/h /g 鲜重)=[ C 标准管×V A 测定管-A 对照管)÷A 标准管-A 空白管÷(W× V ÷V 样总)÷T=7.5×A 测定管-A 对照管)÷A 标准管-A 空白管÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算:

定义:每小时每 1 万个细菌或细胞中Na+K+-ATP 酶分解ATP 产生 1μmol 无机磷的量为一个酶活力单位。

Na+K+-ATP 酶活力(μmol/h /104 cell) =[ C 标准管×V A 测定管-A 对照管)÷A 标准管-A 空白管÷(500×V ÷V 样总)÷T=0.015×A 测定管-A 对照管)÷A 标准管-A 空白管

C 标准管:标准管浓度,0.5μmol/ml;V 总:酶促反应总体积,0.25ml;V 样:加入样本体积,0.1ml ; V 样总:加入提取液体积,1ml;T:反应时间,1/6 小时;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本鲜重, g500:细菌或细胞总数,500 万。

Na++K++-ATP酶检测试剂盒  氧化磷酸化系列



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