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北京百泰派克生物科技有限公司
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避免數(shù)據(jù)不準確:通過這些非變性質(zhì)譜分析技

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品       牌百泰派克

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更新時間:2025-06-04 11:00:56瀏覽次數(shù):145次

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避免數(shù)據(jù)不準確:通過這些非變性質(zhì)譜分析技巧優(yōu)化結(jié)果檢測技術(shù)服務: 非變性質(zhì)譜分析(Native Mass Spectrometry, Native MS)是一種能夠在接近生理條件下研究dànbáizhì及其復合物的強大技術(shù),廣泛應用于dànbáizhì組學、結(jié)構(gòu)生物學和藥物研發(fā)。然而,由于蛋白復合物的復雜性、離子化過程的不穩(wěn)定性及實驗條件的多變性,非變性質(zhì)譜分析的數(shù)據(jù)往往存在不準確或難以解析的問題

避免數(shù)據(jù)不準確:通過這些非變性質(zhì)譜分析技巧優(yōu)化結(jié)果檢測技術(shù)服務詳情介紹

非變性質(zhì)譜分析(Native Mass Spectrometry, Native MS)是一種能夠在接近生理條件下研究dànbáizhì及其復合物的強大技術(shù),廣泛應用于dànbáizhì組學、結(jié)構(gòu)生物學和藥物研發(fā)。然而,由于蛋白復合物的復雜性、離子化過程的不穩(wěn)定性及實驗條件的多變性,非變性質(zhì)譜分析的數(shù)據(jù)往往存在不準確或難以解析的問題,直接影響研究的科學價值和后續(xù)決策。為了幫助科研人員獲得更高質(zhì)量、更具解析度的數(shù)據(jù),本文總結(jié)了七大關(guān)鍵優(yōu)化技巧,助力提升非變性質(zhì)譜分析結(jié)果的準確性和可靠性。


1、優(yōu)化樣品制備,提高dànbáizhì穩(wěn)定性

樣品制備直接影響非變性質(zhì)譜分析的數(shù)據(jù)質(zhì)量,不穩(wěn)定的dànbáizhì或復合物可能在分析過程中發(fā)生解離或變性,影響結(jié)果的可靠性。優(yōu)化樣品制備的方法包括:

(1)使用合適的緩沖體系:選擇揮發(fā)性緩沖液(如醋酸銨或甲酸銨),避免非揮發(fā)性鹽類對非變性質(zhì)譜分析電離過程的干擾。

(2)控制蛋白濃度:蛋白濃度過低可能導致信號弱,而濃度過高則可能引發(fā)非特異性聚集,建議優(yōu)化至 1–10 μM 之間。

(3)維持生理條件:確保溶液 pH 和離子強度適合目標蛋白,減少結(jié)構(gòu)破壞,提高數(shù)據(jù)穩(wěn)定性。


2、選擇合適的電噴霧電離(ESI)條件

電噴霧電離(ESI)是非變性質(zhì)譜分析zuì常用的電離方式,其參數(shù)設(shè)置直接影響蛋白復合物的完整性和信號強度。優(yōu)化ESI的方法包括:

(1)調(diào)整噴霧電壓:低電壓(1–2 kV)可減少dànbáizhì解離,而高電壓可能提高靈敏度但導致構(gòu)象破壞。

(2)優(yōu)化溶劑流速:較低的流速(50–200 nL/min)有助于減少溶劑蒸發(fā)過快導致的復合物解離,提高數(shù)據(jù)穩(wěn)定性。

(3)選擇適當?shù)拿撊軇饬鳎嚎刂茪饬鲝姸?,避免過強的脫溶劑作用破壞dànbáizhì復合物的完整性。


3、提高質(zhì)譜分辨率與靈敏度

高分辨率和高靈敏度的質(zhì)譜儀可提供更清晰的蛋白復合物質(zhì)量信息,減少信號重疊,提高非變性質(zhì)譜分析的準確性。優(yōu)化檢測方法包括:

(1)使用高分辨率質(zhì)譜儀(如 Orbitrap 或 FT-ICR-MS),以減少峰寬度,提高質(zhì)量精度。

(2)優(yōu)化掃描模式:選擇適合大分子檢測的m/z范圍,并結(jié)合多級質(zhì)譜(MS/MS)提高復合物解析度。

(3)增強離子采集:通過增加離子累積時間,提高信號強度,減少低豐度復合物的丟失。


4、結(jié)合離子淌度質(zhì)譜(IM-MS)解析構(gòu)象信息

離子淌度質(zhì)譜(IM-MS)可以區(qū)分相同質(zhì)量但構(gòu)象不同的蛋白復合物,提高非變性質(zhì)譜分析數(shù)據(jù)的解析能力。優(yōu)化IM-MS的方法包括:

(1)調(diào)整氣相分離參數(shù),優(yōu)化離子淌度分離的電場和壓力,提高構(gòu)象解析度。

(2)結(jié)合 CCS(碰撞截面)計算,獲得蛋白復合物的形態(tài)信息,提高對異質(zhì)性復合物的解析能力。


5、采用優(yōu)化的解離策略提高結(jié)構(gòu)解析能力

蛋白復合物的解離策略對非變性質(zhì)譜分析的數(shù)據(jù)解析具有重要影響,不同的解離方法可提供不同層次的結(jié)構(gòu)信息。優(yōu)化解離的方法包括:

(1)使用低能碰撞誘導解離(CID),逐步提高碰撞能量,獲得蛋白復合物的亞基組成信息。

(2)應用表面誘導解離(SID),溫和解離蛋白復合物,保持亞基結(jié)構(gòu)完整性,提高復合物解析能力。

(3)結(jié)合電子轉(zhuǎn)移解離(ETD),專用于研究dànbáizhì的三級結(jié)構(gòu),提供更深入的結(jié)構(gòu)信息。


6、結(jié)合冷凍電鏡(Cryo-EM)和計算模擬優(yōu)化數(shù)據(jù)解析

冷凍電鏡(Cryo-EM)與非變性質(zhì)譜分析的結(jié)合可提供完整的蛋白復合物結(jié)構(gòu)信息,提高結(jié)果的可靠性。計算模擬(如分子動力學模擬)可以幫助預測蛋白復合物在電離過程中的結(jié)構(gòu)變化,提高對實驗數(shù)據(jù)的解釋能力。


7、采用 AI 和機器學習提升數(shù)據(jù)分析能力

人工智能(AI)和機器學習(ML)在非變性質(zhì)譜分析數(shù)據(jù)分析中的應用正逐步增強,優(yōu)化數(shù)據(jù)解析能力的方法包括:

(1)基于深度學習的自動峰識別,減少人為誤差,提高數(shù)據(jù)處理效率。

(2)利用機器學習算法預測蛋白復合物的構(gòu)象狀態(tài),提高對復雜體系的解析能力。

(3)開發(fā)智能化數(shù)據(jù)分析平臺,自動分類和解析蛋白復合物,提高數(shù)據(jù)分析的速度和準確性。


通過優(yōu)化樣品制備、電噴霧電離條件、質(zhì)譜檢測技術(shù)、離子淌度分析、解離策略以及結(jié)合冷凍電鏡、計算模擬和AI數(shù)據(jù)分析,可以顯著提高非變性質(zhì)譜分析數(shù)據(jù)的可靠性和解析能力。合理運用這些優(yōu)化技巧,有助于獲得更jīngzhǔn的實驗結(jié)果,提高研究的科學價值。百泰派克生物科技致力于提供高質(zhì)量的非變性質(zhì)譜分析(Native MS)服務,涵蓋dànbáizhì復合物解析、蛋白-配體相互作用研究、構(gòu)象動態(tài)變化分析等領(lǐng)域。依托zhuānyè的實驗團隊和優(yōu)良的生物信息學分析,我們能夠為基礎(chǔ)研究、藥物開發(fā)和jīngzhǔn醫(yī)學提供定制化解決方案,助力客戶推動科學創(chuàng)新。如需進一步了解或合作,歡迎聯(lián)系我們,共同探索非變性質(zhì)譜分析技術(shù)的更多可能性。


百泰派克生物科技特色項目


一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。


※服務優(yōu)勢:

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。



二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。


※服務優(yōu)勢:

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。



三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。


※服務優(yōu)勢:

1.技術(shù)優(yōu)良,*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù),避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題??稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大,成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質(zhì)譜技術(shù)一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾;

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。



五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),MALDI TOF,高效色譜分離技術(shù),提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務,幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。



百泰派克生物科技七大檢測平臺

避免數(shù)據(jù)不準確:通過這些非變性質(zhì)譜分析技




百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設(shè)備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務,支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務;

2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務;

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等;

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;

5.服務3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!



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