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詳細(xì)介紹
小鼠輸卵管上皮原代細(xì)胞
小鼠輸卵管上皮細(xì)胞分離自輸卵管組織；輸卵管位于子宮底兩側(cè)，包裹在子宮闊韌帶上緣內(nèi)。自子宮兩角分別伸展至左、右卵巢，是輸送卵細(xì)胞進(jìn)入子宮的管道，也是卵受精的場(chǎng)所。輸卵管主要分漏斗部、壺腹部、峽部和子宮部，管壁均由粘膜、肌層和漿膜三層組成。粘膜形成許多縱行而分支的皺襞，壺腹部的皺襞發(fā)達(dá)，高而多分支，故管腔不規(guī)則；至子宮部的皺襞漸減少。粘膜上皮為單層柱狀。由纖毛細(xì)胞和分泌細(xì)胞組成。纖毛細(xì)胞以漏斗部和壺腹部多，至峽部和子宮部逐漸減少，纖毛向子宮方向擺動(dòng)，使卵移向子宮并阻止病菌進(jìn)入腹膜腔.分泌細(xì)胞表面有微絨毛，頂部胞質(zhì)內(nèi)有分泌顆粒，其分泌物構(gòu)成輸卵管液。輸卵管上皮細(xì)胞在卵巢雌激素和孕激素的作用下，隨月經(jīng)周期而有變化。雌激素促進(jìn)輸卵管上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)的功能活動(dòng)，在子宮內(nèi)膜增生晚期(排卵前)。纖毛細(xì)胞變成高柱狀，纖毛增多，分泌細(xì)胞頂部充滿分泌顆粒，功能旺盛。至分泌晚期，兩種細(xì)胞均變矮，分泌細(xì)胞的分泌顆粒排空，纖毛細(xì)胞的纖毛也減少。
英文名稱 | Mouse Fallopian Tube Epithelial Cells | 組織來源 | 輸卵管組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7699 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠輸卵管上皮細(xì)胞
組織來源：輸卵管組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
方法簡(jiǎn)介
普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠輸卵管上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠輸卵管上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
C2C12細(xì)胞，鼠肌原細(xì)胞 H08910(卵巢癌細(xì)胞) 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1 | 核基質(zhì)蛋白3抗體 |
TNF家族B細(xì)胞激活因子抗體 | 嘧啶P450 19抗體 |
單克隆抗體 | 等電壓依賴性陰離子通道抗體 |
細(xì)胞粘附分子配體1抗體 | 羥基酰谷甘肽水解酶樣蛋白抗體 |
胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體 | 甲基化CpG結(jié)合蛋白抗體 |
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022 |
ZR-75-1細(xì)胞，癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)基因鼻咽癌細(xì)胞系,CNE1-lmp\l細(xì)胞 CL-0309TG-905(人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36 |
人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-貼壁生長(zhǎng)HOPC | 瘤牛皮膚細(xì)胞;BIN-S1 |
人皮下脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CL-0272EA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
CCC-ESF-1細(xì)胞，人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞 人癌細(xì)胞,MDA-MB-415細(xì)胞 口腔角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OKM | 小鼠輸卵管上皮原代細(xì)胞等電壓依賴性陰離子通道抗體 |
恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4] | CM-H035人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
Promocell C-28040 Pericyte Growth Medium, 周細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基 500ml | J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
Hep 3B 人肝癌細(xì)胞 | 糖蛋白β-1B抗體 |
鈣蛋白酶1抗體 | 人胃癌細(xì)胞;MGC-803 |
原鈣粘蛋白1抗體 | 臂板蛋白3A抗體 |
酪激酶C-SRC抗體 | EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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