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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的豬心臟微血管周采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的豬心臟微血管周經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 豬心臟微血管周原代細(xì)胞 | 組織來源 | 心臟 |
英文名稱 | Porcine Cardiac Microvascular Pericyte Cells | 貨號 | YS-01X8558 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介：
豬心臟微血管周細(xì)胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來大量研究表明，心肌微血管周細(xì)胞的功能和病理改變直接影響心肌細(xì)胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細(xì)胞模型在心肌缺血 - 再灌注發(fā)病機(jī)制和細(xì)胞間旁分泌細(xì)胞生長因子研究中起著重要作用。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
豬心臟微血管周細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
P3-NS-1/1-Ag4.1細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞,6T-CEM細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9402 | 核糖體結(jié)合蛋白1抗體 |
XAB2蛋白抗體 | 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD5抗體 |
免疫球蛋白E受體Fc ε RIγ抗體 | 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 |
刷狀緣抗體 | 驅(qū)動蛋白家族成員1B抗體 |
血管內(nèi)皮生長因子C型抗體 | 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 |
幼蚊細(xì)胞;C6/36 | 小鼠血細(xì)胞;WEHI-3 [WEHI3] |
HBE細(xì)胞，人支氣管上皮細(xì)胞 小鼠飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞,HPT-8細(xì)胞 CL-0170NG108-15(小鼠細(xì)胞瘤與大鼠膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | U251(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人表皮黑色素細(xì)胞-中色素RNAHEM-m miRNA5 μg | MDA-MB-435(人癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0343HA(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | IL36A Protein Mouse 重組小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白 |
MCF-7(NEW)細(xì)胞，人癌細(xì)胞 小鼠雜交瘤細(xì)胞,ST2/o細(xì)胞 HET-1A, 人食管上皮細(xì)胞 | 豬心臟微血管周原代細(xì)胞凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 |
HT-29, 人結(jié)腸癌細(xì)胞 Human | IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 Caco-2 human colorectal adenocarcinoma cells MEM+20% FBS | 大鼠顆粒細(xì)胞RGC |
倉鼠腎細(xì)胞;HL-1 | 鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體 |
鈣粘蛋白相關(guān)的受體1抗體 | RBE, 人肝膽管癌細(xì)胞 |
孕激素受體膜相關(guān)元件抗體 | 補(bǔ)體4結(jié)合蛋白 |
冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體 | 幼蚊細(xì)胞;C6/36 |
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