化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
小鼠乳腺成纖維原代細胞
小鼠乳腺成纖維細胞分離自乳腺組織；乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間，淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔，一端連于胸肌筋膜，另一端連于皮膚，將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數(shù)可以重復經(jīng)歷生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結締組織伸入乳腺組織之間，形成許多間隔，這些纖維結締組織對乳房起固定作用，而纖維結締組織是由成纖維細胞構成的。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的乳腺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
英文名稱 | Mouse Mammary Fibroblast Cells | 組織來源 | 乳腺組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7560 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠乳腺成纖維細胞
組織來源：乳腺組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠乳腺成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠乳腺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
山羊腎上皮樣細胞;DG-K1 | 胰島素受體相關受體抗體 |
蛋白酶調(diào)解因子10抗體 | 細胞分裂周期相關蛋白JPO2抗體 |
酸化一氧合成酶3（內(nèi)皮型）抗體 | 基質(zhì)金屬蛋白酶18/19抗體 |
鈣整合素結合蛋白1抗體 | 多巴胺受體相互作用蛋白1抗體 |
嘧啶cP450 CYP20A1抗體 | 艾滋病病毒抗體 |
人膀胱基質(zhì)成纖維細胞(HBdSF)(5×105) | CD38 Others Human 人 CD38 人細胞裂解液 (陽性對照) |
破骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | NA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Ana-1(小鼠巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R059大鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL 表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET | Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 Protein (aa 1-725) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠淋巴細胞白血病;L1210 | HCMEC Pellet 人心臟微血管內(nèi)皮細胞團塊 > 1 mio.cells 纖維母細胞粘附檢測試劑盒Fibro |
CM-H079人心臟微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠乳腺成纖維原代細胞基質(zhì)金屬蛋白酶18/19抗體 |
Promocell C-24110 Melanocyte Growth Medium KIT, 黑色素細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml | 大鼠肝癌細胞;RH-35 |
MN-s, 小鼠紋狀體元 | 3T3-L1細胞，小鼠脂肪細胞 人癌細胞,MCF-7(NEW)細胞 大鼠星形膠質(zhì)細胞RA |
TNFRSF18 Others Rat 大鼠 GI / TNFRSF18 人細胞裂解液 (陽性對照) | 補體C1qα鏈多肽抗體 |
kappa型受體抗體 | SPARC Others Human 人 SPARC / Osteonectin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
酸化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關蛋白B抗體 | 前體細胞發(fā)育下調(diào)蛋白4抗體 |
葡萄糖氧化酶1抗體 | 人膀胱基質(zhì)成纖維細胞(HBdSF)(5×105) |
化工儀器網(wǎng)