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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠肌源性干采用膠原酶-蛋白酶-聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心、差速貼壁法，后通過肌源性干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠肌源性干經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠肌源性干原代細胞 | 組織來源 | 骨骼肌組織 |
英文名稱 | Mouse Myogenic Stem Cells | 貨號 | YS-01X7538 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠肌源性干細胞分離自肌肉組織；肌源性干細胞（MDSCs）屬于成體多能干細胞，具有多細胞系分化和自我更新能力。通過誘導刺激，MDSCs可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和細胞等多種細胞和組織類型；作為基因治療和組織工程的供體細胞，已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營養(yǎng)不良等疾病的研究熱點；近年來，肌源性干細胞在治療尿失禁等方面的應用逐步得到重視。需注意的是，肌源性干細胞主要存在于骨骼肌組織中，只是成熟組織的很少部分細胞；平時處于靜止狀態(tài)，在細胞應激和組織缺失時才會激活；并且隨著年齡的增加，所含細胞數(shù)量逐漸減少，而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進行。肌源性干細胞的體外擴增對細胞移植和干細胞介導的基因治療至關重要。對肌源性干細胞的擴增研究發(fā)現(xiàn)，EGF、FGF-2和SCF可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細胞進入有絲分裂周期，從而刺激細胞增生。更重要的是，細胞因子誘導的體外擴增可以通過自我更新不刺激細胞分化，從而保持干細胞表型。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
GLC-82-TK細胞，人肺腺癌細胞(轉(zhuǎn)染TK基因的GLC-82細胞) 非洲綠猴腎細胞,COS-1細胞 CL-0066COLO 205(人結(jié)腸癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 過氧化氫誘導轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 |
Runx3抗體 | 細胞角蛋白18抗體（C端） |
流感病毒H3N8血凝素抗體 | 蛋白酪酸酶樣N前體蛋白抗體 |
生長因子誘導蛋白抗體 | 葡萄糖合成酶2抗體 |
鋅指蛋白Aiolos抗體 | 畸胎瘤衍化生長因子單克隆抗體 |
SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2 | CM-R030大鼠腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
MCF-7 [MCF7], 人癌細胞系 牛胚氣管細胞,EB細胞 Hs 578T(人成纖維細胞) | 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1 |
球狀少突細胞培養(yǎng)基OsM | HFF-1(人成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 |
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3 | Sars結(jié)構蛋白表達株;293 001B |
RL95-2細胞，人子宮內(nèi)膜癌細胞 小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素),AtT-20細胞 人星形膠質(zhì)細胞HA | 小鼠肌源性干原代細胞蛋白酪酸酶樣N前體蛋白抗體 |
OS-RC-2(人腎癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | CD2 Others Rat 大鼠 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CL-0214SK-N-SH(人母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | 動物上皮細胞培養(yǎng)基EpiCM-a-prf |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 | 髓系細胞觸發(fā)受體1抗體 |
復制激活因子C1抗體 | CSF2 Protein Rat 重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽) |
有機溶質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白OSTβ抗體 | 半乳糖激酶1抗體 |
跨膜蛋白BRI抗體 | SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2 |
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