詳細介紹
小鼠骨髓單核原代細胞
小鼠骨髓單核細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細胞是一種未成熟的單核細胞,在骨髓細胞中約占0.04%,被認為是破骨細胞的前體細胞,較外周血單個核細胞誘導的破骨細胞得率高、全骨髓誘導法產(chǎn)生的破骨細胞數(shù)量多,純度高,較脾細胞誘導法分化效率高。骨髓單核細胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細胞,它屬干細胞類型。目前,大多數(shù)研究用淋巴細胞分離液分離提取骨髓單核細胞,近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細胞。
英文名稱 | Mouse Bone Marrow Monocyte Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7525 |
細胞形態(tài) | 巨噬細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠骨髓單核細胞
組織來源:骨髓
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 巨噬細胞樣
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠骨髓單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠骨髓單核經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | 抗重組胰島素抗體 |
cGMP依賴性蛋白激酶1抗體 | 細胞內(nèi)氯離子通道蛋白4抗體 |
IgG-Fc片斷受體轉(zhuǎn)運蛋白α抗體 | MYRIP蛋白抗體 |
淋巴細胞衍生C-型凝集素抗體 | 多巴胺β羥化酶抗體 |
1號染色體開放閱讀框163抗體 | 造血干細胞特異性相關(guān)結(jié)合蛋白1抗體 |
AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人細胞裂解液 (陽性對照) | SFTPD Others Cynomolgus 食蟹猴 SFTPD / COLEC7 / Collectin-7 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人鼻咽癌細胞;CNE-2Z | IL25 Others Rat 大鼠 Ierleukin 25 / IL25 / IL17E 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EFNB2 Others Human 人 EFNB2 / EphrinB2 人細胞裂解液 (陽性對照) | ANGPTL4 Others Mouse 小鼠 ANGPTL4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1) 大鼠胰腺星狀細胞培養(yǎng)基 100mL | F9細胞,畸胎瘤細胞 人肺泡上皮細胞,HPAEpiC細胞 肝實質(zhì)細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml) |
CM-M056小鼠腎實質(zhì)細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠骨髓單核原代細胞MYRIP蛋白抗體 |
Hut-102細胞,人T淋巴瘤細胞系 Walker氏癌肉瘤256瘤株,W256細胞 人小氣道上皮細胞裂解物HSAEpiCL | 人毛細胞cDNAHHDPC cDNA |
小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP | TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IFNL1 Others Human 人 IL-29 / Ierleukin-29 人細胞裂解液 (陽性對照) | 前列腺雄激素抑制信號蛋白1抗體 |
促脂素gamma抗體 | HO-8910細胞,卵巢癌細胞 人胃腺癌細胞,MCG803細胞 大耳山羊肺細胞;LDG-1 |
膽鹽激活脂肪酶抗體 | 營養(yǎng)因子抗體 |
法尼基二酸合酶1抗體 | AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人細胞裂解液 (陽性對照) |