詳細(xì)介紹
小鼠肝實(shí)質(zhì)原代細(xì)胞
小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞是指具有肝功能的單位,是肝臟的基本組成單位之一。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞與主要病生理變化:急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞屬于中高度分化細(xì)胞,生長營養(yǎng)需求高,在體外存活時間短;細(xì)胞呈圓形或多角形,核大而圓,居中,常染色質(zhì)豐富,部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官,在整個物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的作用。
英文名稱 | Mouse Hepatic Parenchymal Cells | 組織來源 | 肝臟組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7134 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞
組織來源:肝臟組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肝實(shí)質(zhì)采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肝實(shí)質(zhì)經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1 | 整合素α4抗體 |
橋粒斑菲素蛋白1抗體 | 第七號染色體開放閱讀框12抗體 |
纖連蛋白2抗體 | 錯配修復(fù)蛋白3抗體 |
末端補(bǔ)體復(fù)合物抗體 | DISC1 N端抗體 |
1號染色體開放閱讀框174抗體 | HDHD2蛋白抗體 |
F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 / Ephrin-A4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人表皮黑色素細(xì)胞-深色素cDNAHEM-d cDNA | IFNG Others Ferret 雪貂 IFNG / Ierferon Gamma 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MCF-7(人癌細(xì)胞) | CD27 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD27 / TNFRSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
C-33 A(人子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 T-107B蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30 | LCC9細(xì)胞,人癌抗雌激素耐藥株 草魚腎臟細(xì)胞,CIK細(xì)胞 肝星形細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
CM-M068小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠肝實(shí)質(zhì)原代細(xì)胞錯配修復(fù)蛋白3抗體 |
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R 大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 人慢性髓系白血病細(xì)胞;K562 |
雪羊皮膚細(xì)胞;SSHS1 | BCCIP Others Human 人 BRCA2 / BCCIP 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人正常來源細(xì)胞 PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化) Rattus | 酪蛋白激酶δ1抗體 |
脂肪瘤相關(guān)蛋白抗體 | CM-H115人腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
酸化促凋亡Bik蛋白抗體 | 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 |
G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白1抗體 | F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |