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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的小鼠鼻黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的小鼠鼻黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 小鼠鼻黏膜上皮原代細胞 | 組織來源 | 鼻黏膜 |
英文名稱 | Mouse Nasal Mucosal Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X8493 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠鼻黏膜上皮細胞分離自鼻黏膜組織；黏膜是覆蓋在機體內消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內壁的一層組織結構，由上皮組織和疏松結締組織構成。根據(jù)部位不同，有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結構也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜，簡稱鼻黏膜，覆蓋于鼻腔表面，黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。根據(jù)結構與功能的不同，鼻黏膜又分為前庭部、呼吸部和嗅部三部分。前庭部是鄰近外鼻孔的部分，有豐富的鼻毛可以阻擋空氣中較大的塵粒吸入。呼吸部占鼻黏膜的大部，有發(fā)達的上皮纖毛，它們可向咽部擺動，黏著有塵粒、細菌的黏液排向咽部，終將它們排出體外。此外，此部分有豐富的血管與腺體，對吸入的空氣有加溫和濕潤作用。嗅部黏膜范圍較小，主要位于鼻腔頂部。它含有一種專司嗅覺的嗅細胞及嗅腺，它們分泌能溶解到達嗅區(qū)的含氣味的微粒，刺激嗅細胞表面上的嗅毛產生嗅覺，而且還由于嗅細胞具有不同的受體，可分別接受不同化學分子的刺激，因此可產生不同的嗅覺。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠鼻黏膜上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
P3X63-Ag8.653細胞，鼠骨髓瘤細胞 人Butt`s淋巴瘤細胞,NAMALWA細胞 小鼠網織細胞肉瘤;M5076 | 骨硬化病相關跨膜蛋白1抗體 |
RFTN2蛋白抗體 | 細胞分裂周期蛋白8抗體 |
酸相互作用結構域蛋白1抗體 | 蛋白激酶A調節(jié)亞基a1抗體 |
干細胞抑制相關蛋白TRIM32抗體 | 配對盒基因3抗體 |
鋅指蛋白393抗體 | 肌脂蛋白抗體 |
AsPC-1(人胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | 小鼠正常肝細胞;NCTC 1469 [NCTC1469] |
MDA-MB-453細胞，癌細胞 人食管鱗癌,KYSE 450細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414) | 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2 |
小鼠表皮角質形成細胞培養(yǎng)基 100mL | IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白 |
CL-0125J82(人膀胱癌細胞)5×106cells/瓶×2 | CL-0204Sf-21(昆蟲細胞)5×106cells/瓶×2 |
THP1-Blue (穩(wěn)定株)人單核細胞 THP1-Blue (stable sain) in human monocytes 1640+10% FBS(熱滅活)+200ug/ml Zeocin+0.05mM β-ME | 小鼠鼻黏膜上皮原代細胞蛋白激酶A調節(jié)亞基a1抗體 |
肝實質細胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml) | CL-0307SW1116(人結腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
BSG Others Human 人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照) | Hela S3(人細胞) 5×106cells/瓶×2 |
小鼠卵巢上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 四分子交聯(lián)體17抗體（四旋蛋白） |
肺α/β水解酶蛋白3抗體 | 人腎系膜細胞cDNAHRMC cDNA |
抑癌基因NDRG2抗體 | 白細胞介素4誘導蛋白1抗體 |
柯薩奇病毒蛋白受體B抗體 | AsPC-1(人胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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