【产品推介】MSI标准品

时间：2021-4-1阅读：2384

微卫星不稳定性（Microsatellite Instability,MSI），是指由于在DNA复制时插入或缺失突变引起的微卫星（Microsatellite,MS）序列长度改变的现象，常由错配修复功能（Mismatch repair,MMR）缺陷引起。MS序列，是一些短而重复的DNA序列，一般由1~6个核苷酸组成，串联重复排列，常见类型为双碱基CA/GA/GT或单碱基A/T等。MS序列可以位于基因的重要非编码区，也可以位于基因的编码区，多态性分布于整个基因组，个体差异大。MSI现象于1993年被Jacobs等人在结直肠癌中*发现，与癌症发生有关，可以用于癌症检测。

MSI检测方法

MSI常由MMR基因突变及功能缺失导致。因此，在检测癌细胞中的MSI时，既可以通过检测MMR基因缺失来确定是否发生MSI，如依赖于免疫组化技术的蛋白水平检测，也可以直接检测MSI的序列变化，如PCR（聚合酶链反应）检测等的分子水平检测。

（一）免疫组化方法

免疫组化方法（Immunohistochemistry, IHC）：采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中错配修复基因MLH1、MSH2、MSH6及PMS2的表达。任何一项错配修复基因表达缺失，被定义为MSI，否则即为微卫星稳定（MSS）。其中一个表达缺失则称为低度微卫星不稳定(MSI-L)，2种或2种以上蛋白表达缺失为高度微卫星不稳定(MSI-H)。

（二）分子水平的检测

1.聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR)技术
目前主要采用多重荧光PCR结合毛细管电泳的方法。通过PCR方法检测特异的微卫星重复序列扩增判定MSI状态，比较肿瘤患者的标本组织与正常组织的位点突变情况。其比较的位点为美国国家癌症研究所（NCI）推荐的5个微卫星位点：BAT25、BAT26、D5S346、D2S123及D17S250。其中≥2个位点发生改变判定为高度微卫星不稳定（MSI-H），仅1个位点发生改变判定为低度微卫星不稳定（MSI-L），无位点改变判定为微卫星稳定（MSS）。有研究认为，二核苷酸重复序列的特异性和灵敏度比单核苷酸重复序列要低，因此关于MSI检测的位点仍存在争议。Bacher等对266个微卫星位点(其中包括单核苷酸、二核苷酸、四核苷酸以及五核苷酸微卫星位点)检测的敏感性及准确性进行评估，提出了Promega分析系统，该系统使用五个单核苷酸微卫星位点(BAT-25, BAT-26, NR-21, NR-24和MONO-27)及两个五核苷酸微卫星位点(Penta C和Penta D)检测MSI。大量的实验证实，MMR免疫组化检测结果与MS的PCR检测结果有高度关联性，灵敏度92%，特异性可达100%。

2.新一代测序方法（Next Generation Sequencing, NGS）
NGS又称为第二代测序技术，是一种高通量测序技术，能一次性对几十万到几百万条基因分子进行序列测定。目前NGS方法已经成为检测MSI的新工具，其优势是可以实现多位点高通量检测。纪念斯隆·凯特琳癌症研究中心（Memorial Sloan Kettering Cancer Center，MSK）的一项研究使用NGS方法对12,288例实体瘤病人进行检测，判定MSI状态，并用MSI-PCR/MMR-IHC进行了验证。实验证明, NGS方法较MSI-PCR方法具有更高的敏感性。

科佰生物可以提供MSI的诊断标准品，保证诊断方法的检测限、灵敏度、稳定性。