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供应简介

用于体外分离外周血淋巴细胞，也可以从其他来源中分离单核细胞，包括脐带血细胞和骨髓细胞。

详细介绍

用途：

用于体外分离外周血淋巴细胞，也可以从其他来源中分离单核细胞，包括脐带血细胞和骨髓细胞。

方法概述：

早期分离白细胞的方法，会用一种化合物混合血液。此化合物能够聚集红细胞，只轻微影响白细胞。通过离心，红细胞由于密度增加而聚集沉淀，同时从离心管内上层收集白细胞。

Böyum提出了一种更方便快速的分离方法，即以Ficoll^®-甲泛影钠溶液为介质进行离心。稀释的血液在Ficoll-甲泛影钠溶液中分层，之后低速短时离心。红细胞和多形核粒细胞沉降到管底，单个核细胞（淋巴细胞）和血小板可以从两个分层间的分界面处收集。

许多研究者不断改进了Böyum方法，对于MP生物医学公司生产的LSM，其方法的*之处在于成功运用泛影酸钠代替了甲泛影钠。

程序原理：

去纤维蛋白或肝素化人血以1：1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释，在分离溶液中分层，低速离心30min。离心过程中，由于差速迁移zui终形成不同的细胞层。

聚集在管底的颗粒主要是红细胞和多形核粒细胞，它们通过梯度迁移至管底。由于其密度不同，淋巴细胞和其他单个核细胞（单核细胞和血小板）分布在血浆和LSM两层之间。淋巴细胞可以通过吸取分界层溶液回收，zui后进一步清洗去除血小板，LSM和血浆。

试剂：

LSM^® 是一种滤膜过滤除菌的溶液，每100ml包含6.2g聚蔗糖和9.4g泛影酸钠。20℃下密度是1.0770-1.0800g/ml。

使用说明：

以下的操作步骤是zui初由Böyum.设计的程序中众多改良版本的一种。此程序经改良用于去纤维蛋白或抗凝血剂处理过的人体血液；对于其他物种或者其他组织的血液，改变此程序也许是有必要的。

1. 轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合

2. 无菌转移3 ml LSM到15 ml离心管中。

3. 混合2 ml去纤维蛋白血液或肝素化血液和2 ml 生理盐水

4. 仔细的将稀释血液加入含有3 ml LSM（室温）的15ml离心管中，在血液和LSM中形成一个明显的分层。不要将稀释血液混合入LSM中。

5. 室温下400xg离心15-30min，离心可以沉淀红细胞和多形核白细胞，同时可以在LSM上形成一层单核淋巴细胞，如上图所示（具体分层情况为血浆层-单个核细胞层-LSM层-RBC颗粒）。

6. 吸出淋巴细胞上方2-3mm的血浆。

7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM，并转移到另外一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至离心管内的淋巴细胞层中，室温（18-25°C）离心10分钟，离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞即刻，例如160 – 260 xg（清洗去除LSM，并降低血小板的百分比）。

8. 再用平衡盐缓冲液清洗细胞，zui后用适当的培养基重悬细胞?！?/span>

订购信息：相当于sigma公司的Histopaque^®-1077产品

名称	货号	规格	单价	*
淋巴细胞分离液（MPbio公司产品）	0850494X	100ML	660元	190元
淋巴细胞分离液（MPbio公司产品）	0850494	100ML*5	1549元	1150元
相当于sigma公司的Histopaque^®-1077产品也相当于GE公司的Ficoll-Paque PREMIUM 我们公司的特点是现货，折扣大，质量更加稳定，大批量采购更优惠!

厂家说明

MP Biomedicals生物医学公司是位于美国加利福尼亚州的生命科学和生物技术厂商。2004年底成功收购Qbiogene、ICN，现在有5个大型仓库，能够及时供应各行业需求，亚洲仓库位于新加坡。它致力于生命科学领域的基础研究和探索。目前它提供55000多种产品，是世界上能全面提供生命科学产品和临床诊断产品的几家厂商之一。

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