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Murine RNase inhibitor(40U/µl) 鼠源RNase抑制剂
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格（元） |
Murine RNase inhibitor(40U/µl) 鼠源RNase抑制剂 | 10603ES05 | 2KU | -20 ºC | 216.00 |
Murine RNase inhibitor(40U/µl) 鼠源RNase抑制剂 | 10603ES10 | 10KU | -20 ºC | 916.00 |
Murine RNase inhibitor(40U/µl) 鼠源RNase抑制剂 | 10603ES20 | 20KU | -20 ºC | 1695.00 |
Murine RNase inhibitor(40U/µl) 鼠源RNase抑制剂 | 10603ES60 | 100KU | -20 ºC | 11865.00 |
产品描述
RNase抑制剂（RNase inhibitor）是人的胎盘中存在的一种特异性核糖核酸酶(RNase)抑制剂，能够特异地与RNase以非共价键结合形成复合体从而使RNase失活。本产品是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂，能够广泛抑制各种RNase (RNase A, B, C)，此外经过RT-PCR、RT-qPCR检验，本品能与HieffTM Reverse Transcriptase、M-MLV (H-) Reverse Transcriptase以及各种DNA Polymerase兼容。与人源RNase inhibitor相比，本品不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱氨酸，因而具有更高的抗氧化活性，且更加适合于对高DTT敏感性实验 (如qPCR)。
可用于cDNA*链合成、多核糖体的分离(Polysome isolation)、体外转录和体外无细胞翻译系统。
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。产品-20 ºC保存。有效期2年。
活性定义
抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。RNase A 的活性通过水解Cyclic 2', 3'-CMP 生成3'-CMP定量求得。
质量控制
核酸外切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg λ-Hind III在74℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA残留检测：50 μl体系中，加入200 U本品，以ddH2O为模板，扩增E. coli 16 s rDNA基因。35个循环后进行1%琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
应用实例
1. 在RNase free离心管中配制如下混合液：
RNase free ddH2O | to 20 μl |
5 × HieffTM Buffer | 4 μl |
Oligo (dT)18 (50 μM) | 1 μl |
dNTP Mix (10 mM each) | 1 μl |
RNase Inhibitor (40 U/μl) | 1 μl |
HieffTM Reverse Transcriptase (200 U/μl) | 1 μl |
模板RNA | 10 pg-2.5 μg |
2. 轻轻混匀。
3. 50 °C 45min, 70 °C 15 min。
4. 产物于-20℃保存。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）抑制RNase活性的pH值范围较广，在 pH 7～8时表现zui大活性。
3）起泡或剧烈搅拌 (Vortex等)会引起失活。
4）不抑制RNase H活性。
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