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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品介绍
Nt.BspQI 是一种切刻内切酶，与传统的内切酶不同，仅切割 dsDNA 底物的一条链，在dsDNA 底物上产生切口，而不全切断DNA分子。
产品信息
货号 | 15210ES84 |
规格 | 2000 U |
识别位置 | 5'-GCTCTTCN-3' 3'-CGAGAAGN-5' |
酶活 | 10U/μL |
反应条件 | 1×Nt.BspQI Buffer；50℃孵育 |
失活条件 | 80℃温育20 min |
酶活定义 | 单位活性单位(U)是指在 50 μL反应体系中，50℃ 1 h内可以将1 µg的超螺旋pUC19 DNA转化成开环形式所需的酶量 |
组分信息
组分编号 | 组分名称 | 15210ES84 |
15210-A | Nt.BspQI(10 U/μL) | 200 μL |
15210-B | 10×Nt.BspQI Buffer | 2×1 mL |
储存条件
-25~-15℃保存，有效期2年。
使用说明
1. 体系配制
1）建议冰上操作，按如下加样顺序配制反应体系
组分 | 体积 |
ddH2O | up to 50 μL |
10×Nt.BspQI Buffer | 5 μL |
底物DNA* | 1 μg |
Nt.BspQI(10 U/μL) | 1 μL |
Total | 50 μL |
*DNA 底物中应不含苯、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐，否则将会影响 Nt.BspQI 酶活性
2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴。
3) 50℃孵育 30~60 min。
4) 80°C孵育20 min即可使酶失活，停止反应，或者通过吸附柱或苯/氯仿纯化终止反应。
2. 不同DNA中的识别位点数
λDNA | ΦX174 | pBR322 | pUC57 | pUC18/19 | SV40 | M13mp18/19 | Adeno2 |
10 | 1 | 1 | 1 | 1 | 0 | 0 | 7 |
3. 甲基化修饰影响
Dam | Dcm | CpG | EcoKI | EcoBI |
无影响 | 无影响 | 无影响 | 无影响 | 无影响 |
注意事项
1. 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%，避免酶中过多的甘油引起星号活性。
2. 限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂 ( 例如甘油、盐 ) 与底物溶液中的污染物 ( 例如盐、EDTA 或乙醇等 ) 相同，反应体积越小，酶切反应抑制效应越强。
3. 本产品仅作科研用途。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
