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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
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产品介绍
产品简介
N-糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶，经过和平空间站伊丽莎菌克隆，主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。翌圣酵母重组表达N-糖苷酶 F（比活性：750000 U/mL），可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间的酰胺键，同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品带his标签，常应用于抗体及其相关蛋白去糖基化。
另外，我司还提供其他类型的糖苷酶，包括酵母重组表达的N-糖苷酶 F（Cat#20407ES，比活性：100000 U/mL），糖苷内切酶H（Cat#20414ES），糖苷内切酶S（Cat#20413ES）。
产品信息
编号 | 组分名称 | 20415ES01 | 20415ES02 |
20415-A | PNGase F | 15 KU | 75 KU |
20415-B1 | Buffer 1（10×） | 150 μL | 750 μL |
20415-B2 | Buffer 2（10×） | 300 μL | 1500 μL |
20415-B3 | 10% NP-40 | 300 μL | 1500 μL |
产品性质
中文别名（Chinese synonym） | N-糖酰胺酶F；N-糖苷酶 F |
英文别名（English synonym） | PNGase F |
来源（Source） | 酵母重组表达 |
分子量（Molecular weight） | 36 kDa |
比活性（Specific activity） | 750000 U/mL |
缓冲液组分（Buffer） | 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50% Glycerol |
酶活定义（Unit Definition） | 1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中，37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。 |
储存条件
-15~-25℃保存，有效期1年。
使用说明
变性条件下蛋白质去糖基化
1）在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白（1-20 μg），至终体积10 μL；
2）100℃温度下煮沸10 min使其变性，冰上冷却，离心10秒；
3）加入2 μL的Buffer 2、2 μL的10％NP-40、6 μL去离子水，总反应体积20 μL；
4）加入0.2~0.5 μL的PNGase，轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。
非变性条件下蛋白质去糖基化
1）在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白（1-20 μg）至最终体积为 20 μL。
2）加入 0.5~1 μL 的PNGase F, 轻轻混匀。
3）37°C 孵育 4-24 h。
注意：在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化，在非变性条件下可能需要增加PNGase F的量和延长孵育时间。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
