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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业,制药/生物制药 |
|---|
产品介绍
产品描述
E. coli DNA ligase可以催化相邻DNA链的5’-PO4末端与3’-OH末端形成磷酸二酯键，对平末端底物DNA几乎无明显连接活性。其反应的最适pH为7.5-8.0（Tris-HCl buffer），反应需NAD作为辅酶。与T4 DNA Ligase可连接粘性末端和平末端相比，本酶只能催化突出末端DNA之间的连接，但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下，也能连接平滑末端的DNA。另外，本款产品不能催化DNA与RNA以及RNA之间的连接反应。
该酶可以用于NGS甲基化建库中进行连接反应，另外也可以用于Okayama-Berg法克隆cDNA。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |||
14955ES75 | 14955ES82 | ||||
14955-A | E. coli DNA ligase (60 U/μL) | 5 μL | 20 μL | ||
14955-B | 10× E. coli DNA ligase Buffer | 30 μL | 100 μL | ||
14955-C | 10× BSA（0.05%） | 30 μL | 100 μL | ||
【注】：BSA应避免反复冻融，短期时间内使用可置于4℃。
单位定义
在20 μL的连接反应体系中，6 μg的 λ DNA-Hind III 在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为一个活性单位（U）。
运输和保存方法
干冰运输。-20℃保存，有效期1年，避免反复冻融。
注意事项
1）Buffer 在融解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3）本产品仅作科研用途！
使用方法
1. 在无菌微量离心管中配制以下反应体系：
组分 | 体积 |
DNA | 1 μg |
10× E. coli DNA ligase Buffer | 2 μL |
E. coli DNA ligase (60 U/μL) | 1 μL |
10× BSA（0.05%） | 2 μL |
灭菌水 | Up to 20 μL |
2. 16℃温育1小时或过夜。
