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供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,制药/生物制药 |
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产品简介
2×Hieff® PCR Master Mix是即用型的常规PCR预混合溶液,含有Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl2以及优化的缓冲体系。反应时只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤。本产品中含有优良的稳定剂,在4℃条件下以放置3个月。PCR产物具有3’-dA突出端,可轻松克隆至T载体。
储存条件
-25~-15℃保存,有效期2年。
使用说明
组分 | 体积 (μL) | 循环步骤 | 温度 (°C) | 时间 | 循环数 | |
模板DNA | 适量 | 预变性 | 94 | 5 min | 1 | |
Primer 1 (10 μM) | 2 | 变性 | 94 | 30 sec | 35 | |
Primer 2 (10 μM) | 2 | 退火 | 50-60 | 30 sec | ||
2×Hieff® PCR Master Mix | 25 | 延伸 | 72 | 30 sec/kb | ||
ddH2O | to 50 | 终延伸 | 72 | 10 min | 1 | |
表1 扩增体系(50 μL) | 表2 扩增条件 |
【注】:使用前请务必将其混匀。
1)模板使用量:基因组DNA:50-200 ng;质粒DNA:0.1-10 ng。
2)Mg2+浓度:本产品中含有3 mM的MgCl2,适合大部分PCR反应。
3)退火温度:请参考引物的理论Tm值,退火温度可设置低于引物理论值2-5℃。
4)延伸时间:分子鉴定建议30 sec/kb?;蚩寺〗ㄒ?0 sec/kb,以保证产物量达到最高。
注意事项
1.本产品PCR产物不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3.本产品仅作科研用途!
应用实例
图1:2×Hieff® PCR Master Mix扩增1.2 kb片段。产品分别在-20℃放置1年,4℃放置3个月,25℃放置1个月后均可有效扩增目的片段。模板:拟南芥基因组;退火温度:60℃;延伸时间:40 sec。