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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 500U |
|---|---|---|---|
| 货号 | 10611ES76 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业 |
产品介绍
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
UCF.ME® Deoxyribonuclease I (DNase I) GMP-grade | 10611ES76 | 500 U | 645 |
10611ES84 | 2000 U | 1965 | |
10611ES92 | 10000 U | 6455 |
产品描述
Deoxyribonuclease I (DNase I) 脱氧核糖核酸酶I是一种核酸内切酶，可消化单链及双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸。它可使磷酸二酯键发生水解从而产生含有5'-磷酸基团和3'-OH基团的单脱氧核苷酸和寡脱氧核苷酸，平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase I可催化多种形式DNA，如单链DNA、双链DNA，甚至染色质（其切割速率受组蛋白影响）。最佳的工作pH范围是7-8，DNase I的活性依赖于Ca2+，并可被二价金属离子如Co2+，Mn2+，Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下，该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点；而在Mn2+存在的条件下，可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割形成平末端，或1-2个核苷酸突出的粘末端。DNase I广泛应用于不含DNA的RNA制备；去除体外转录之后的模板DNA；在RT-PCR及RT-qPCR反应前制备不含DNA的RNA；结合DNA聚合酶I通过切口移位进行DNA标记；DNA片段化文库构建。
本品是按照 GMP 工艺要求生产，产品以无菌液体形式提供。
产品性质
来源 | 重组E. coli |
最适温度 | 37℃ |
蛋白纯度 | ≥95% |
RNA酶残留 | 10 U未检出（阴性） |
宿主蛋白残留 | <50 ppm |
细胞内毒素 | <0.05 EU/30 U |
储存缓冲液 | 10 mM Tris-HCl pH 7.6，2 mM CaCl2，50%甘油 |
活性单位定义 | 37℃、10 min内使1 μg的质粒DNA*降解所需要的酶量。 |
【注】：具体产品质检数据及更多指标请查看批次质检报告。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | ||
10611ES76 (500 U) | 10611ES84 (2000 U) | 10611ES92（10000 U） | ||
10611 | Deoxyribonuclease I (DNase I) | 250 μL | 1 mL | 5 mL |
运输和保存方法
干冰运输。-20℃保存，有效期一年。推荐分装保存，避免反复冻融。
注意事项
1、酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
应用实例
反应体系：使用RNase-free离心管及枪头配制如下反应体系：
组分 | 体积（μL） |
10×DNase I Buffer | 1 μL |
DNase I | 1 μL |
RNA | X |
RNase-free ddH2O | Up to 10 μL |
【注】：10×DNase I Buffer配方为10 mM Tris-HCl, 2.5 mM MgCl2,0.5 mM CaCl2, pH7.6@25℃。
反应条件：37℃，15-30 min后，加入终浓度2.5mM EDTA溶液混匀后65℃ 10 min。处理后的模板可用于后续RT-PCR等反应。
DNase I失活或抑制：加入EDTA至终浓度为2.5 mM后，65℃加热10 min可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂，达到毫摩尔/升浓度的锌离子，0.1%的SDS，DTT、巯基乙醇等还原剂，50-100 mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。
HB220325
