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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 40000 U（40 KU） |
|---|---|---|---|
| 货号 | 10301ES40 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业 |
本品主要适用于标记RNA 3’-末端，环化RNA和DNA寡聚核苷酸以及克隆cDNA等核酸操作。
产品介绍
产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格（元）
Hieff® Quick T4 DNA Ligase (400 U/µL)
10301ES40
40000 U (40 KU)
446.00
产品描述Hieff® Quick T4 DNA Ligase是一款可用于NGS建库过程中DNA片段和接头连接的单酶产品，该产品已经过高通量测序验证，质量优异。对于无需进行体系调整的客户，推荐选购Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607）。
产品组分组分编号
组分名称
规格
10301-A
Hieff® Quick T4 DNA Ligase (400 U/µL)
100 µL
10301-B
10 × T4 DNA Ligase Buffer
250 µL
运输和保存方法
冰袋运输，-20℃保存，有效期2年。
单位定义
在20 μL的连接反应体系中，6 μg的λDNA-Hind Ⅲ分解物在16℃下反应30 min时，催化50%以上的DNA片段发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
注意事项
1）Buffer在融解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3）本产品仅作科研用途！使用方法
1.目前主流的合并法DNA建库试剂盒，其末端修复和加A处理后一般不纯化，直接进行接头连接。本试剂盒可与主流的商业化末端修复加A体系兼容，进行接头连接。反应体系请参考如下配制，涡旋瞬离后置于20℃，反应15 min即可。
表1. Adapter Ligation体系
名称
体积（μL）
dA-tailed DNA
60
10 × T4 DNA Ligase Buffer
10
50% PEG6000
10*
DNA Adapter
X**
Hieff® Quick T4 DNA Ligase
1-5***
ddH2O
To 100
【注】：*试剂盒内未提供50% PEG6000，需自行准备。
**接头用量参考表2。
***Hieff® Quick T4 DNA Ligase用量可根据需要添加1-5 μL。
2. Adapter的质量和使用浓度直接影响连接效率及文库产量。Adapter用量过高可能会产生较多Adapter Dimer，用量较低可能会影响连接效率及文库产量。表2列举了使用本试剂盒，不同Input DNA量推荐的Adapter使用量。
表2. 500 pg-1 μg Input DNA推荐的Adapter使用浓度
Input DNA
Adapter : Input DNA摩尔比
Input DNA
Adapter : Input DNA摩尔比
1 μg
10:1
50 ng
100:1
500 ng
20:1
25 ng
200:1
250 ng
40:1
1 ng
200:1
100 ng
100:1
500 pg
400:1
【注】：Input DNA摩尔数（pmol）≈ Input DNA质量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均长度（bp）]。
【接头添加计算举例】：当Input DNA为100 ng，Input DNA长度为300 bp时，接头应该添加多少？
第一步，计算Input DNA摩尔数。公式：Input DNA摩尔数（pmol）≈ Input DNA质量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均长度（bp）]；
Input DNA摩尔数（pmol）=100 ÷（0.66×300）=0.5 pmol；
第二步，计算接头添加摩尔数。根据表2查询接头添加比例；
根据表2，查得Input DNA 100ng时接头添加比例100:1，则接头添加摩尔数=100×0.5 pmol=50 pmol；
第三步，计算接头添加体积。接头浓度=15 μmol/L（如使用其他接头，浓度需要依据其他接头浓度参数）；
接头添加体积=接头添加摩尔数（50 pmol）÷接头浓度（15 μmol/L）=3.34 μL（注：15 μmol/L=15 pmol/μL）
综上，接头可添加3.4 μL。（注：接头最大加入体积不超过5 μL）
相关产品产品名称
货号
规格
价格（元）
Hieff NGS®MaxUp II DNA Library Prep Kit for Illumina
12200ES08/24/96
8/24/96 T
2456/6486/23567
Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module
12608ES24/96
24/96 T
2066/6166
Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module
12607ES08/24/96
8/24/96 T
1423/3263/10863
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1
12615ES04/16
12×4/12×16 T
1256/4536
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 2
12616ES04/16
12×4/12×16 T
1256/4536
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 3
12617ES04/16
12×4/12×16 T
1256/4536
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 4
12618ES04/16
12×4/12×16 T
1256/4536
2×Super Canace® Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification
12621ES24/96
24/96 T
583/1783
Hieff NGS® DNA selection Beads（Superior Ampure XP alternative）
12601ES08/56
5/60 mL
986/6286
dsDNA HS assay kit for Qubit®
12640ES60/76
100/500 T
686/2696
HB210722
