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供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
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Endotoxin Removal Agarose Resin, High Performance
产品简介
Endotoxin Removal Agarose Resin是一种用于去除生物源蛋白类产品(包括蛋白、多肽、抗体、多糖等)中内毒素的树脂。其原理是将修饰过的多素B连接至4%琼脂糖微球上,进行特异性去除内毒素,经纯化可将样品中内毒素降低至0.1 EU/mL,且样品回收率高。
产品信息
货号 | 20518ES10/ 20518ES60/20518ES76 |
规格 | 10 mL /100 mL / 500 mL |
产品性质
基质(Matrix) | 4%琼脂糖微球 |
配体(Ligand) | 修饰过的多素B |
粒径(Bead size) | 45-165 µm |
载量(Capacity) | >2000000 EU/mL基质 |
最大压力(PressureMax) | 0.1 MPa, 1bar |
pH稳定范围(pH range) | 5-10 |
储存缓冲液(Buffer) | 20%乙醇 |
储存条件
2~8℃保存,有效期2年。
需准备试剂
所用水和Buffer以及耗材均需无热原处理,防止在使用过程中引入内毒素。
平衡液:20 mM 磷酸盐,150 mM NaCl,pH7.4。
再生液:1% Triton X-114的平衡液
【注】平衡液和洗脱液可根据样品性质进行改变,建议pH7-8, NaCl约150 mM-500 mM。
使用说明
【注】a 样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质以防阻塞柱子;
b 内毒素结合柱子的最佳pH为6-9,因此样品pH最好控制在7-8;
c 样品最好控制在适当的离子强度,减少非特异吸附,NaCl约150 mM-500 mM。
样品纯化(以1 mL树脂为例)
1)装柱:充分混匀Endotoxin Removal Agarose Resin,用无热原枪头吸取适量浆液加入合适的层析柱中,注意避免产生气泡,打开下出口去掉?;ひ?,用3 mL再生液进行清洗,控制流速在0.25 mL/min,或<10滴/min,温度控制在2~8℃,重复至少2次,确保柱中无内毒素。
2)平衡:用3 mL的平衡液平衡柱管内壁及树脂,流干,流速约0.5 mL/min,温度控制在2~8℃,重复至少两次。
3)过柱及检测:将样品加到平衡好的树脂中,调节流速在0.25 mL/min,或<10滴/min,当流出液流出约1 mL 时,开始收集流出液,流干后加入1 mL平衡液继续收集。检测样品中内毒素含量及样品回收率。
【注】如果样品中内毒素含量仍高于目标值,继续重复1-3。
注意事项
1.本品可耐受试剂:20%DMSO,20%乙醇,20%甘油;1 M尿素,300 mM咪唑;0.05% Tween 20,10 mM DTT等。
2.本产品仅作科研用途。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
附表 问题及解决方案
问题 | 原因分析 | 推荐解决方案 |
内毒素去除效率低 | 样品pH值不在内毒素结合范围内 | 用0.1 M NaOH或0.1 M HCl调节至pH7-8 |
样品与树脂接触时间短 | 减少流速,增加样品接触时间 | |
去除或检测系统被内毒素污染 | 所有试验用品均需无热源产品 | |
内毒素与目的蛋白结合较强 | 优化样品pH,使样品与内毒素分离 增加接触时间 | |
样品被污染 | 树脂纯化过其他样品 | 不用使用过的树脂去除不同样品内毒素 |
样品回收率低 | 样品非特异性吸附在树脂上 | 增加样品和平衡液的NaCl浓度 |
目的蛋白与内毒素结合一起被去除 | 优化样品pH,使样品与内毒素分离 |
Ver.CN20230719