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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 货号 | 40735ES75 |
|---|---|---|---|
| 应用领域 | 生物产业 |
产品介绍
产品详情
产品介绍
鬼笔环肽（Phalloidin）是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏（Amanita phalloides）的环状七肽毒素，以高亲和力（Kd= 20 nM）选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin，而不会与单体肌动蛋白G-actin结合，通常用来标记组织切片，细胞培养物或无细胞体系中的F-actin，从而对F-actin进行定性和定量分析。另外，鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维，无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞，按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。非特异性结合几乎可忽略，染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此，鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白（Actin）抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小，直径约12-15?，分子量＜2000 Daltons，未标记肌动蛋白（Actin）的许多生理特性都得以维持，比如，同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白，原肌球蛋白，DNase I等仍能发生反应；鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质；以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
鬼笔环肽（Phalloidin）的结合阻止丝状肌动蛋白（微丝）的解离，稳定微丝结构，从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度（CC）降至＜1 µg/mL，因此，可用作一种聚合促进剂。此外，鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
本品为FITC标记的鬼笔环肽，染色反应特异性强，对比性高，具有比Actin抗体更好的染色效果，适合用作F-actin的定性和定量检测。另外，经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性，适用性广泛。
我司提供储存液形式（浓度为20 µM）的FITC标记鬼笔环肽，用户根据自身需求选择，建议使用浓度为80~200 nM。
产品特色
| 分子式（Molecular Formula） | C56H60N10O15S2 |
| 分子量（Molecular Weight） | 1177.3 |
| 最大激发/发射波长（Ex/Em） | 495~496/513~516 nm |
| 多肽序列（Sequence） | FITC-bicyclic(Ala-DThr-Cys-cis-4-hydroxy-Pro-Ala-2-mercapto-Trp-4-hydroxy-5-amino-Leu)(S-3 to 6) |
| 外观（Appearance） | 淡黄色至黄色溶液 |
存储条件
冰袋运输。-20 ℃避光干燥保存，1年有效。
FAQ
Q：为什么我激发后荧光很快就猝灭了？
A：可能是使用浓度过高造成，可以再适当降低一些试剂浓度；可以在寻找视野时使用低能量的激光，待找到合适视野时使用高能量激光激发观察。2.鬼笔环肽不能和点击反应（例：EDU）共染色，否则鬼笔环肽没荧光信号。
Q：该试剂可以应用于组织切片吗？
A：石蜡切片或者冰冻切片都不建议，可能效果不好，建议使用抗肌动蛋白的抗体。
Q：每次是添加多少试剂量（工作液）进行荧光显微镜检测？
A：建议添加的量是能够全浸没细胞即可，不同的细胞染色情况不同，相应鬼笔环肽使用量也需根据不同情况而定。
Q：几种不同的鬼笔环肽的区别是什么，如何选择？
A：是荧光基团的不同，激发出的荧光颜色不同，用于区分共染时其他荧光染料的荧光颜色，对于选择需要机器满足激发和发射波长要求。
Q：细胞处理时，须用BSA 封闭吗？
A：是的，这样做可以降低背景色。
Q：鬼笔环肽染色存在种属区分吗？
A：对于对固定的细胞染色，不区分种属。
Q：想染植物细胞微丝，鬼笔环肽能不能使用？
A：由于植物含细胞壁，因此在未破坏细胞壁时染色进入细胞内较为困难，因此对于含细胞壁细胞染色可以去除细胞壁制备原生质体进行染色。
Q：染色后多久进行上机观察检测，可以放置过夜吗？
A：不推荐，染色后应尽量在 60min 内完成上机观察和检测过程。
Q：关于几种产品的状态及含量问题介绍？
A：iFluor 系列的 40737、40762、40736 均为粉末，40734 和 40735 均为液体形式提供。对于 300T
的含量不是指含有 300ul，具体的 300T 是指能检测 300 次左右。
Q：我用鬼笔环肽染小鼠的巨噬细胞，发现鬼笔环肽没有进入巨噬细胞中，而是在巨噬细胞的表面，
有什么更好的建议嘛？
A：巨噬细胞染色效果较差一些，建议延长透化时间，例如用丙酮（≤-20℃）脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理 10-15min。
Q：鬼笔环肽可以染活细胞，以及染色后可以用流式检测嘛？
A： 不推荐，荧光标记的鬼笔环肽不具有细胞透性，因此没有被广泛用于活细胞标记 。
Q：我的细胞过表达G-actin，会不会影响鬼笔环肽的染色效果？
A：不会影响鬼笔环肽的染色效果。因为鬼笔环肽只选择性结合于丝状肌动蛋白 F-actin，而不会与
单体肌动蛋白 G-actin 结合。
Q：鬼笔环肽可以双标染色吗？
A：可以，例如可以与 DAPI 溶液对细胞核进行复染。
Q：鬼笔环肽可以跟免疫荧光同时做吗？
A：可以和抗体共染，可以先染抗体，再做鬼笔环肽的染色。
Q：可以用那些溶液来固定细胞，要注意什么？
A：可以用溶于PBS 的 4%多聚jia醛溶液进行细胞固定，固定时避免固定剂中含有甲醇成分，因为甲醇
在固定过程中可能破坏肌动蛋白F-actin。
Q：鬼笔环肽染色后，封片保存在 4 度冰箱一段时间后，再检测信号可以吗？
A：不建议这样操作，因为封片后鬼笔环肽的荧光信号会逐渐减弱。建议现加现测。
