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制備色譜填充柱方法

閱讀:3637      發(fā)布時(shí)間:2012-8-20
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 制備填充柱操作步驟:

1)把空柱豎直架在滴定架上,兩端向上,夾緊。

2)色譜柱有兩種,一種是兩端一樣長(zhǎng)的,另一種是兩端一長(zhǎng)一短的,兩端一樣長(zhǎng)的在填充時(shí)不分方向,而兩端一長(zhǎng)一短的則有方向性,長(zhǎng)的一端接進(jìn)樣口,短的一端接檢測(cè)器;裝柱前要將小三角漏斗接在進(jìn)樣口的一端;用10cm長(zhǎng)的軟橡膠管將柱和漏斗套在一起,注意要套得緊一些,以免加入載體時(shí)會(huì)外泄。

3)將玻璃棉捏成2cm長(zhǎng)的一條(不用捏的太?。肟罩訖z測(cè)器一端,深度為5-10cm。

4)把約50cm長(zhǎng)的硅橡膠管(普通橡膠管也行,但效果略差)一頭接在抽氣機(jī)上(套上一層紗布以防止填料被抽入抽氣機(jī)內(nèi)),另一頭擋在空柱接檢測(cè)器一端。

5)在小漏斗里加入少許填料(1-2mL),用橡膠棒輕輕敲擊空柱使載體落入柱管中,開動(dòng)抽氣機(jī)1-2s再關(guān)閉,使這少許載體快速到達(dá)玻璃棉部位并形成有效阻塞。

6)一邊持續(xù)開動(dòng)抽氣機(jī),一邊在漏斗里加入填料,并慢慢敲擊柱的不同位置,使填料盡量緊密;基本填滿時(shí)仔細(xì)敲擊柱,填料緊縮一點(diǎn)就再加入一點(diǎn),直至再無法緊密為止;如果是玻璃珠,zui后填滿的位置可以和檢測(cè)器端的玻璃棉位置相平,如果是不銹鋼柱,則兩端都填滿至端口。

7)拔掉進(jìn)樣口端的小漏斗,加入一條玻璃棉,塞緊。

8)如果是玻璃柱,要先在兩端各套上一個(gè)膠圈,防止螺母落下時(shí)打碎柱。

9)在柱上做標(biāo)記后(推薦掛金屬小牌),裝入柱溫箱中老化。

注意事項(xiàng):如果是玻璃柱,在操作中要小心折斷。但是玻璃柱由于是透明的,可以看到填充效果;不銹鋼柱雖然不會(huì)折斷,可是在填充時(shí)看不到效果,只能憑經(jīng)驗(yàn)填滿為止。涂固定液時(shí)應(yīng)當(dāng)注意涂漬均勻,要經(jīng)常攪動(dòng)溶液但要輕巧,不要損壞載體。老化時(shí)要注意保持低的載氣流速,逐漸升溫,老化要充分,這樣才能達(dá)到較好的柱效。

 

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