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豬丹毒分子生物學診斷技術

2012-10-17  閱讀(1555)

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日本Okayama大學的研究者們建立了檢測豬丹毒的PCR方法(1999)。

 
    常規(guī)細菌培養(yǎng)檢測豬丹毒至少要3天,鑒定血清型大約要lo天,而這種PCR法可在5h內完成。它使用兩步擴增法,先用高度特異性引物組M0101-M0102進行初步擴增之后,再添加4種特異性寡核苷酸引物組對4種不同血清型豬丹毒的16SrRNA序列進行擴增。
 
    rRNA基因簇包括16SrRNA、23SrRNA、5SrRNA、下游非編碼區(qū)。對該簇編碼的DNA序列進行測定,以設計種特異性PCR檢測系統(tǒng)的引物。豬紅斑丹毒絲菌2型、3型、18型及扁桃體丹毒絲菌血清?型的rRNA基因的DNA序列的同源性在96.0%一98.4%。
 
    以前DNA探針雜交法和常規(guī)PCR都不能區(qū)分豬丹毒屬這4種血清型,而這種PCR擴增法是特異的,能逐一區(qū)別鑒定,而且它可以從患病動物的組織樣品中直接進行PCR試驗并得出結果。整個試驗不超過5h,這種對編碼rRNA基因簇的DNA序列的特異性系統(tǒng)PCR擴增法十分,易讀顯示結果,可快速診斷屠宰場豬丹毒菌感染豬。

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