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IgG中吐温系表面活性剂的LC/MS分析 (ODP2 HP-2D)Shodex HPLC色谱柱和标准品
抗体药物为了防止IgG的凝集和吸附会添加少量表面活性剂，HILIC色谱柱在品质管理的时候表面活性剂的浓度管理非常重要。以下是使用聚合物基质反相高效液相色谱柱ODP2 HP-2D分析IgG样品中混合了抗体药物中经常使用的表面活性剂吐温 20(聚氧乙烯 20)和吐温 80(聚氧乙烯 80)的样品，不进行前处理，直接使用LC/MS测试。在碱性的条件下IgG不会被色谱柱保留，HILIC色谱柱直接被色谱柱洗脱，吐温系列由于反相作用被色谱柱保留。所以，把IgG洗脱5分钟以后的样品导入MS系统可以不进行前处理(除蛋白)，不受到IgG的离子抑制的影响，分析吐温系表面活性剂。
Sample : 2 μL
(Blank)Tween 20 47 mg/L (H2O)
(Model solution)
Tween 20 47 mg/L + IgG 1 g/L
(in 0.3 M NaCl aq.)
Sample : 2 μL
(Blank)Tween 80 57 mg/L (H2O)
(Model solution)
Tween 80 57 mg/L + IgG 1 g/L
(in 0.3 M NaCl aq.)
Column : Shodex ODP2 HP-2D (2.0 mm I.D. x 150 mm)
Eluent : (A) 0.1 % NH3 aq. / (B) CH3CN
High pressure linear gradient;
(B %) 20 %(0 to 5 min), 20 to 90 %(5 to 19 min), 90 %(19 to 24 min),
90 to 20 %(24 to 25 min)
Flow rate : 0.2 mL/min
Detector : UV (280 nm), ESI-MS (SIM Positive)
Column temp. : 40 ℃