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局部组织结构荧光染料 HistoBright

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富士胶片和光(广州)贸易有限公司是日本富士胶片和光纯药株式会社(FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation)在中国的子公司,主营富士胶片和光品牌试剂产品,供应产品超50,000种,囊括了生命科学、药品生产、品质管理领域、合成与材料、分析各个领域。


基于“想要为科研人员提供帮助”的创业初衷,富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)作为一家满足前沿研究领域需求的综合试剂制造商,一直致力于生产和开发高品质的产品,并于2022年6月迎来了创业100周年。通过发挥企业优势“技术力”,以及三大核心业务的试剂业务、化成品业务和临床诊断业务来满足学术界、企业以及医疗相关企业的广泛需求。


凭借100 年的历史经验,富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)在日本市场占据高份额,作为全球性的试剂供应商,以“成就科学未来之力,创造幸福源泉”为愿景,致力于高品质试剂的生产与开发。通过提供试剂,为再生医疗、癌症、精神/神经疾病和抗体药物等各类基础研究和前沿研究做贡献,并获得 ISO9001等多项国际认证?;诳煽康募际鹾推分?/span>、以及科研人员之间的信赖,作为富士胶片集团的一员将不断实现全球化发展。


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主要业务——试剂


作为富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)试剂业务的中国子公司,富士胶片和光(广州)贸易有限公司可提供各个领域测试和研究用途的生命科学试剂和化学试剂。


试剂业务

可广泛提供生命科学和化学领域的测试研究用产品



生命科学领域


化学领域



 

培养基生产

 ● 抗体制备

 ● 定制服务



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认证标准品

 ● 有机化学


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作为优质的试剂企业,我们可以提供满足不同客户需求的高品质产品。试剂业务自创业以来,已持续不断地提供了广泛领域的试剂产品,并致力于成为满足前沿技术领域各项研究需求的试剂制造商。今后也将以过往技术经验为基石,发挥作为可信赖的研究支持合作伙伴的作用。



产品一览

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● 常规试剂

● 有机合成试剂

● 环境分析试剂

● 精密分析试剂

● 色谱试剂

● 生化学用试剂

● 基因研究用试剂

● 免疫研究用试剂

● 病理研究用试剂

● 细胞培养用试剂

● 内毒素检测用试剂

● 生物药生产用培养基

● 研究用基础培养基

● 定制服务

● 设备和耗材










丰富的产品类目以及快速供应体系

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致力于持续监测市场的需求并跟踪世界的研究动向。为了能够及时准确地响应客户的需求,富士胶片和光建立了以自有品牌为中心的丰富产品体系,为各界的研究和开发领域提供细致的服务与支持 。













高品质的试剂提供和生产体系

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试剂生产工厂以东京工厂和大阪工厂为中心,发挥优质技术力量建立的高品质生产体系。爱知工厂配备齐全的培养基生产设备,可用于生产再生医疗和生物制药生产用的培养基。













优质的客户服务和产品信息

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通过定期更新的主页网站、富士胶片和光生物微信公众号、富士胶片和光化学分析微信公众号,以及不定期的富士胶片和光生物视频号、网络研讨会和线下展会,致力于为客户提供优质的服务以及不断更新的产品信息。













强化全球化事业的开展

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建立日本海外销售体系,通过提供富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)优质研发力量生产的高品质产品,积极推进全球化业务。














企业历史沿革


年份

内容

1922年6月

  从武田長兵衞商店(现武田薬品工業株式会社)的化学药品部门独立出来,成立了武田化学薬品

 株式会社

1940年

  大阪工厂竣工

1944年

  東京工厂竣工

1947年

  更名为和光純薬工業株式会社

1950年

  展开化成品业务

1952年

  总部迁移至大阪

1960年

  展开临床检测药业务

1968年

  播磨工厂竣工

1972年

  公司总部竣工

1974年

  成立德国和光純薬有限会社(今?FUJIFILM Wako Chemicals Europe GmbH)

1981年

  成立美国和光純薬株式会社(今?FUJIFILM Wako Chemicals U.S.A Corporation)

1989年

  建设东部配送中心

1991年

  建设西部配送中心

2004年

  愛知工厂竣工

2012年

  成立和光純耀(上海)化学有限公司(今?富士胶片和光纯药(上海)化学有限公司)

2015年

  收购株式会社シバヤギ(今?群馬办事处)

2017年

  成为FUJIFILM Corporation的全资子公司

2018年

  更名为富士胶片和光纯药株式会社

2019年

  合并IS Japan Co.,Ltd.(今?户田办事处)

2022年

  成立100周年





























生物化学试剂、仪器和耗材

供货周期 一个月以上 应用领域 生物产业,制药/生物制药

可实现局部组织结构可视化的荧光染料局部组织结构荧光染料 HistoBright

HistoBright




HistoBright是一种可实现双光子激发的环境响应型膜染色荧光色素,组织渗透性优异,可根据组织的局部结构改变荧光特性,因此可实现高对比度的组织可视化。结合组织透明化处理和双光子激光显微镜使用,可对组织块进行深度观察和空间结构分析。


本产品基于高知大学和爱媛大学的研究成果,由funakoshi(株)生产并销售。

本产品仅供研究使用,研究以外的目的不可使用。



局部组织结构荧光染料 HistoBright


HistoBright 是一种环境响应型荧光染料,可根据溶剂的极性显示出大范围的波长。应用于透明化处理后的组织时,荧光会响应组织内的微环境而发生变化,随后配合双光子激光显微镜即可清晰地观察到组织结构。



◆传统的组织结构分析方法和新型的三维组织结构分析


传统的组织结构分析,是通过有色染料对组织进行染色实现的,如苏木精-伊红(HE)染色法。而使用这些有色染料很难将组织块整块染色,一般需制成薄切片后再进行观察。但薄切片很容易丢失组织结构的三维信息,因此需要制备大量切片才能重现三维结构。

HistoBright是高知大学教育研究部的仁子阳辅博士合成的新型环境响应型荧光染料(原著论文中的化合物名为PC),目前由爱媛大学医学部的今村健志博士、村上正基博士、川上良介博士推进开发应用于三维组织结构的荧光成像染料。HistoBright会聚集在生物膜上,并根据所在局部环境不同,荧光在绿光~近红外光的大范围内变化。因此,当HistoBright应用于生物组织时,它可以根据组织结构诱导荧光色调的变化,从而实现高对比度观察组织结构。由于HistoBright能够进行双光子激发,因此除了激光共聚焦显微镜外,还可以使用双光子激光显微镜进行观察。此外,配合组织透明化处理(除保持膜结构进行脱脂操作的方法外),使用HistoBright可在不破坏组织结构(不制备薄切片)的前提下观察厚组织样本,并通过双光子激光显微镜进行深度成像,实现组织的三维结构分析。



◆特点


● 环境响应型的膜染色试剂,能根据周围环境表现出绿光~近红外光的荧光特性。通过区分需要检测的荧光波长范围,可实现高对比度的局部组织结

 构可视化。

配合无脱脂处理的组织透明化处理(如RapiClear(SunJin Lab公司)、LUCID等),可实现深度的组织结构三维分析。

※ 使用表面活性剂(Triton X-100、Tween 20等)会溶解组织中的脂质膜,可能对HistoBright的染色产生影响,因此不推荐使用。如需使用,请讨论适用条件。

使用激光共聚焦显微镜镜(推荐激发光:488 nm激光)或双光子激光显微镜(推荐激发光:960 nm激光)皆可进行观察。

使用双光子激光显微镜观察时,可配合使用二次谐波发生(SHG)成像,在使用本试剂的同时观察未染色组织中的胶原纤维。

使用HistoBright进行染色和观察后,可进行HE染色。



◆原著原文


Inoue, K., et al., J. Mater. Chem. B., 10(10), 1641~1649 (2022). Synthesis and photophysical properties of a new push-pull pyrene dye with green-to-far-red emission and its application to human cellular and skin tissue imaging. [PMID:35194628]



◆原理


激发/发射光谱


HistoBright是一种根据溶剂的分子极性改变荧光特性的溶剂极性响应型荧光染料(Solvatochromic fluorescent dye)。根据溶剂的极性,荧光会从绿色(低极性)向近红外光(高极性)的范围内大幅变动。


局部组织结构荧光染料 HistoBright

   

溶剂

最大吸收波长(nm)

最大荧光波长(nm)

荧光量子产率

Toluene

424

546

0.82

EtOAc

418

581

0.77

CHCl3

427

610

0.83

MeCN

414

641

0.65

EtOH

427

691

0.2

MeOH

426

712

0.07









脂质体膜模型中荧光光谱的变化


HistoBright对脂质膜显示高亲和性,并根据脂质膜的相态表现出不同的荧光特性。与有序相Lo模型(鞘磷脂(SM)/胆-固-醇(Chol))脂质体中的荧光最大值不同,无序相Ld模型(DOPC)脂质体中的最大波长也转移到了约30 nm的长波长范围,荧光量子产率也从0.72(SM/Chol)下降到了0.37(DOPC)。

局部组织结构荧光染料 HistoBright

※ 以上荧光光谱数据均由高知大学 仁子阳辅博士提供。



◆应用数据


使用双光子激光显微镜对透明化人正常皮肤组织进行成像


使用4% paraformaldehyde/ PBS固定人正常皮肤组织块后,制备成500 μm的切片,同时进行76 h的组织透明化处理(LUCID)和HistoBright(10 μM)染色。通过双光子激光显微镜,用960 nm处激光激发组织块,分别在492 nm(SHG:青色)、500-550 nm(绿色)、560~593nm(橙色)和 593-690 nm(红色)处分别获取荧光图像,制作以下4幅合成图像。


※ 492 nm(青色)来源于组织中胶原纤维的SHG信号,而非HistoBright来源的荧光信号。


局部组织结构荧光染料 HistoBright



接下来,使用双光子激光显微镜在Z轴方向以5 μm的间隔连续拍摄500 μm的图像,并使用图像分析软件进行三维构建,以三维方式将人皮肤组织的精细结构可视化。


局部组织结构荧光染料 HistoBright




使用双光子激光显微镜对透明化人正常皮肤组织进行三维成像


使用4% paraformaldehyde/PBS固定人正常皮肤组织块后,制备成1 mm的切片,同时进行72 h的组织透明化处理(RapiClear、SunJin Lab公司)*、HistoBright(10 μM)染色和核染色(Hoechst33342)。通过双光子激光显微镜,用1100 nm处激光激发组织块,分别在<492 nm(SHG:青色)、500~550 nm(绿色)、560~593 nm(橙色)和 593-690 nm(红色)处分别获取荧光图像,制作以下4幅合成图像?;谝陨咸跫赯轴方向以5 μm的间隔连续拍摄,使用图像分析软件进行三维构建,将连续的数据制作成动画。


* 本实验中的组织块固定后未进行透膜处理,直接透明化处理和染色。


真皮的观察图像                    

表皮的观察图像                    

局部组织结构荧光染料 HistoBright                    

局部组织结构荧光染料 HistoBright                    















完整视频请查看:labchem.fujifilm-wako.com.cn/product/show/1646.html


重复用于HE染色


使用HistoBright染色并观察人正常皮肤细胞组织块,在PBS中静置,去除透明化试剂。然后制备成薄切片,进行HE染色。已确认HistoBright染色后,仍可进行清晰的HE染色。


局部组织结构荧光染料 HistoBright



在激光共聚焦显微镜和双光子激光显微镜下观察染色


使用4% paraformaldehyde/ PBS固定人正常皮肤组织块后,制备成0.5 mm的切片,同时进行72 h的组织透明化处理(RapiClear、SunJin Lab公司)*和HistoBright(10 μM)染色。随后,使用激光共聚焦显微镜镜(左图:激发光488 nm激光)和双光子激光显微镜(右图:激发光960 nm激光)进行观察。虽然两幅图像没有明显区别,但在双光子激光显微镜下可以观察到双光子激发的SHG信号(胶原纤维)。

* 本实验中的组织块固定后未进行透膜处理,直接透明化处理和染色。


局部组织结构荧光染料 HistoBright


※ 以上图像数据均由爱媛大学 川上良介博士提供。



◆产品列表


产品编号产品名称产品规格
FDV-0051HistoBright 0.1 mg




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