抗VGLUT1，豚鼠

Anti VGLUT1, Guinea Pig

VGLUT（Vesicular Glutamate Transporter）是将哺乳类兴奋性突触传递中主要的神经递质谷-氨酸转运至突触囊泡的转运蛋白，研究认为它转运谷-氨酸时利用了质子电化学梯度。目前已在哺乳动物中发现VGLUT1、VGLUT2 和 VGLUT3三种亚型，它们的表达部位各不相同， VGLUT1主要在大脑皮层和海马体表达，VGLUT2在丘脑、下丘脑和杏仁核等部位表达。而表达VGLUT3的神经元很少，有报告称，根据mRNA表达模式推断，VGLUT3分布于纹状体、海马体、大脑皮层、中缝核等部位^1）。在神经科学领域中，抗VGLUT抗体也被用作谷-氨酸能神经元的标记抗体。

“抗VGLUT1，豚鼠”是豚鼠来源的抗VGLUT1多克隆抗体，可用于免疫组化染色的多重染色。

◆抗体信息

◆Protocol（示例）

 1. 灌注固定：使用0.1%柠檬酸钠/PBS灌注除血后，4% PFA灌注

 2. 后固定： 4% PFA （4 h）

 3. 蔗糖替换：30%蔗糖/PBS（4℃，过夜~约2天）

 4. 制备冰冻切片：去除蔗糖后，制备冰冻包埋块，并用低温切片机制备30 μm厚的切片

 5. 甘-氨酸处理：25 mM甘-氨酸PBS（20 min左右）

 6. 封闭：5% 正常山羊血清，0.3% Triton X-100/PBS（4℃，过夜）

 7. 一抗：抗VGLUT1, 豚鼠（1︰1,600），1% 正常山羊血清，0.3% TritonX-100/PBS（4℃，过夜~2 天）

 8. 清洗：0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)

 9. 二抗：Alexa Fluor^® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L) (1:1,600) （产品编号： 568-77901)，

              1% 正常山羊血清，0.3% TritonX-100/PBS (室温，2 h)

10. 清洗：0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)

11. 封装： 4℃下避光存储

◆数据

应用数据

▼ 免疫组化染色

物种：小鼠；部位：海马体；样品：冰冻切片；抗体浓度：1:1,600

<数据提供> 京都工艺纤维大学 应用生物学系 宮田老师  

神经细胞的染色使用NeuroTrace™ 435/455 Blue Fluorescent Nissl Stain（ThermoFisher Scientific, Inc.）                    

◆Q＆A

关于Protocol

Q：使用哪种二抗比较好？

A：FUJIFILM Wako拥有以下二抗的实绩：

Alexa Fluor^® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L)（Jackson ImmunoResearch公司，产品编号：568-77901)

关于应用

Q：可以用于什么动物？

A：已确认可用于小鼠和大鼠，暂未确认是否可用于其他动物。

◆参考文献

1.Gras, C. et al.: J. Neurosci., 22(13), 5442(2002).

A third vesicular glutamate  transporter expressed by cholinergic and serotoninergic neurons

◆产品列表