諾博萊德 PCR產(chǎn)物純化試劑盒 核酸提取

PCR Purification Kit PCR產(chǎn)物純化回收試劑盒

目錄號(hào):43012

產(chǎn)品內(nèi)容：

自備試劑：

無(wú)水乙醇

保存條件：

室溫（15 ~ 25℃）

產(chǎn)品特點(diǎn):

1. 快速：步驟少，操作簡(jiǎn)便，整個(gè)操作僅需 15 分鐘。

2. 高效：每個(gè)離心吸附柱可吸附 10 ug 以上的 DNA 片段，回收效率在 85%以上。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

注意事項(xiàng)：

1.   Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性，消除高溫潮濕或其他不良環(huán)境因素對(duì)吸附柱造成的影響。收到貨后 2 個(gè)月內(nèi)，不用做柱平衡。

2.  使用前請(qǐng)先檢查Buffer BL、Buffer DB 是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。
3. 回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越小，回收率越低。

操作步驟:

第一次使用前，請(qǐng)先在 Buffer WB 中加入無(wú)水乙醇，并打?qū)礃?biāo)記，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。

從 PCR 反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液中回收 DNA 片段

1.   柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 100 ul 平衡液Buffer BL，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液，將吸附柱重新放回收集管中。（請(qǐng)使用當(dāng)天處理過(guò)的柱子）

2.   加結(jié)合液：估計(jì)PCR 反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液的體積，向其中加入 5 倍體積溶液 Buffer DB，充分混勻。

（如果樣本體積小于 100ul,用滅菌水補(bǔ)齊 100ul,以提高回收效率。）

3.吸附：將上一步所得溶液加入一套吸附柱中，室溫放置 1 min，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液。

（ 注意：吸附柱容積為 750ul，若樣品體積大于 750ul 可分批加入）

4.漂洗：加入 600ul Buffer WB，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液。

5.  二次漂洗：重復(fù)操作步驟 4。

6.    干燥：將離心吸附柱于 12,000 rpm 離心 2 min，甩干殘留漂洗液。

7.   {C}洗脫：將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 離心管中，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脫液Buffer EB，室溫放置 2 min。12,000 rpm 離心 1 min 收集 DNA 片段。

（注意：為增加回收效率，可將洗脫液在 60℃預(yù)熱，也可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置 2 min，再次離心收集。）

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