諾博萊德 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 核酸提取

Gel DNA Purification Kit瓊脂糖凝膠純化回收試劑盒

目錄號:43011

產(chǎn)品內(nèi)容：

自備試劑：

無水乙醇

保存條件：

室溫（15 ~ 25℃）

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

產(chǎn)品簡介：

本試劑盒適用于從TAE或TBE瓊脂糖凝膠中回收DNA片段，使用本產(chǎn)品可回收 100bp-10kb大小的DNA片段，回收率可達85%-95%。該試劑盒操作簡便，得到的 DNA 片段可用于酶切、連接、測序等實驗。

產(chǎn)品特點：

1.         快速：步驟少，操作簡便，整個操作僅需 15 分鐘。

2.          高效：每個離心吸附柱可吸附 10 ug 以上的 DNA 片段，回收效率在 85%以上。

注意事項：

1.   {C}Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性，消除高溫潮濕或其他不良環(huán)境因素對吸附柱造成的影響。收到貨后 2 個月內(nèi)，不用做柱平衡。

2.   {C}使用前請先檢查Buffer BL、Buffer DB 是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。

3.   切膠時，紫外照射時間應(yīng)盡量短，以免對 DNA 造成損傷。

4.   回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越小，回收率越低。

操作步驟

第一次使用前，請先在 Buffer WB 中加入無水乙醇，并打?qū)礃擞?，加入體積請參照瓶上的標簽。

從瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段

1. {C}柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 100 ul Buffer BL，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液，將吸附柱重新放回收集管中。（請使用當天處理過的柱子）

2.  切膠：在長波紫外燈下，用干凈刀片將目的 DNA 條帶切下，盡量切除不含 DNA 的凝膠。

3.     稱重：將切下的含有目的 DNA 條帶的凝膠，放入 1.5 ml 離心管中，稱取凝膠重量（去除空管重量）。如果凝膠重量為 100mg，其體積可視為 100ul。

4.  溶膠：加入 3 倍體積 Buffer DB，56℃水浴，直到凝膠完quan溶解，期間顛倒混勻 2 次加速溶膠。

（如果凝膠濃度大于 2%，應(yīng)加入 6 倍體積 Buffer DB。對于回收<100 bp 的小片段，可在凝膠完quan溶解后，再加入 1.5 倍膠塊體積的異丙醇以提高回收率。）

5.  吸附：待溶液冷卻至室溫后加入吸附柱中，室溫靜置 1 min，然后 12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液。

（如果總體積超過 750 ul，可分 2 次將溶液加入同一離心吸附柱中）

6.  漂洗：加入 600 ul 漂洗液Buffer WB，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液。

7.  二次漂洗：重復(fù)操作步驟 6。

8.  干燥：將吸附柱放回收集管中， 12,000 rpm 離心 2 min，甩干膜上殘留的乙醇，防止其抑制下游反應(yīng)。

9.     回收：將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脫液 Buffer EB，室溫放置 2 min，12,000 rpm 離心 1 min 收集 DNA 片段。

（注意：為增加回收效率，可將洗脫液在65℃預(yù)熱，也可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置 2 min，再次離心收集。）

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