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Biotin-Insulin,生物素標(biāo)記胰島素的概述

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    2025年05月27日
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Biotin-Insulin,生物素標(biāo)記胰島素
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資料簡介

Biotin-Insulin(生物素標(biāo)記胰島素)是一種通過生物素(Biotin)標(biāo)記的胰島素復(fù)合物,具有高度特異性、強(qiáng)信號(hào)放大能力、多功能應(yīng)用和穩(wěn)定性,在生物醫(yī)學(xué)研究和藥物開發(fā)中具有重要應(yīng)用價(jià)值。以下是對其的詳細(xì)介紹:

合成方法

  1. 溶解胰島素與標(biāo)記試劑:將胰島素溶解在PBS緩沖液中,配制成2-4mg/mL的溶液;把生物素標(biāo)記試劑溶解在二甲基亞砜中,再加入適量緩沖液使其充分溶解并活化。

  2. 標(biāo)記反應(yīng):將活化后的生物素標(biāo)記試劑緩慢滴加到胰島素溶液中,在合適的溫度下攪拌反應(yīng)1-4小時(shí)。

  3. 純化:反應(yīng)結(jié)束后,使用透析袋或超濾裝置對標(biāo)記后的胰島素進(jìn)行純化,去除未反應(yīng)的生物素標(biāo)記試劑和其他雜質(zhì)。

  4. 檢測與驗(yàn)證:采用紫外-可見光譜、熒光光譜、質(zhì)譜等方法進(jìn)行檢測和驗(yàn)證,以確保標(biāo)記成功且產(chǎn)物符合要求。

應(yīng)用領(lǐng)域

  1. 免疫分析:在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)等免疫檢測方法中,使用Biotin-Insulin來檢測和量化胰島素。

  2. 生物化學(xué)研究:用于研究胰島素與其受體的相互作用,以及其在細(xì)胞和組織中的作用。

  3. 藥物開發(fā):用于開發(fā)和優(yōu)化胰島素相關(guān)藥物,并評估其效果和穩(wěn)定性。

  4. 細(xì)胞成像:Biotin-Insulin可以通過親和素介導(dǎo)的連接,固定在各種基質(zhì)上,如微孔板、磁珠或玻片,在細(xì)胞成像等實(shí)驗(yàn)中具有廣泛應(yīng)用。

  5. 定量檢測:通過生物素標(biāo)記,胰島素可以與帶有熒光、酶或金屬標(biāo)記的親和素復(fù)合物結(jié)合,實(shí)現(xiàn)高靈敏度的定量檢測。

  6. 研究胰島素受體:Biotin-Insulin還可用于研究胰島素受體與胰島素的結(jié)合機(jī)制,特別是在細(xì)胞表面或組織切片上,通過使用熒光或其他標(biāo)記的親和素進(jìn)行檢測。

優(yōu)勢

  1. 高靈敏度和高特異性:生物素能與親和素或鏈霉親和素結(jié)合,形成極其穩(wěn)定的四聯(lián)體復(fù)合物,這種特性使生物素標(biāo)記的胰島素在各種生物實(shí)驗(yàn)中具有高靈敏度和高特異性。

  2. 多功能性:Biotin-Insulin可以通過親和素介導(dǎo)的連接,固定在各種基質(zhì)上,如微孔板、磁珠或玻片,這使得它在ELISA、Western blot、免疫沉淀和細(xì)胞成像等實(shí)驗(yàn)中具有廣泛應(yīng)用。

  3. 穩(wěn)定性:生物素標(biāo)記胰島素具有較好的穩(wěn)定性,能夠在各種實(shí)驗(yàn)條件下保持其活性。

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