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如何使用奧林巴斯顯微鏡CX43暗場功能

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    2025年04月24日
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杭州實了個驗生物科技有限公司
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資料簡介

奧林巴斯顯微鏡CX43具備暗場觀察功能,適用于觀察透明或低對比度的樣品,如活細胞、微生物、細胞膜等。暗場顯微鏡通過特殊的光學配置,在樣品上投射斜向光線,使樣品在散射光下顯示出高對比度的圖像,而背景則保持黑暗。這種功能可以讓觀察者看到那些在常規明場條件下無法清晰觀察的細微結構。以下是如何使用奧林巴斯CX43顯微鏡的暗場功能的步驟:

一、準備工作

  1. 確保設備穩定

    • 將顯微鏡放置在一個穩定的工作臺上,確保在觀察過程中不會有震動影響。

  2. 清潔樣品和顯微鏡

    • 使用清潔的玻璃載片和蓋玻片準備樣品,避免污漬或灰塵影響圖像質量。

    • 清潔顯微鏡的物鏡、目鏡以及鏡頭等部件,確保無塵污漬,以避免影響觀察效果。

二、暗場觀察模式的設置

  1. 選擇適當的物鏡

    • 暗場觀察通常使用較低倍率的物鏡(如10x或20x),以便獲得足夠的視野和亮度。

    • 需要注意,CX43顯微鏡支持不同倍率的物鏡,可以根據觀察的樣品選擇合適的物鏡。

  2. 安裝暗場聚光鏡

    • 奧林巴斯CX43顯微鏡需要使用專門的暗場聚光鏡。通常,CX43配有與暗場觀察兼容的聚光鏡,在安裝時,需要確保將暗場聚光鏡正確安裝到聚光鏡座上。聚光鏡通常具有不同的數值孔徑(NA),選擇合適的數值孔徑有助于提高圖像質量。

    • 聚光鏡數值孔徑選擇:在暗場模式下,一般選擇數值孔徑較大的聚光鏡(如NA 0.9或1.4),這有助于提高圖像的亮度和對比度。

  3. 調整光源和亮度

    • 啟動顯微鏡的光源,調節亮度至合適的水平。在暗場觀察中,光源的亮度需要調節得比較高,但又不能過于刺眼,以避免過度曝光或圖像質量過差。

    • 奧林巴斯CX43顯微鏡的LED光源亮度可以調節,根據樣品的不同,適當增加或減少亮度。

三、調整光學系統

  1. 調節光闌(Aperture Diaphragm)

    • 暗場顯微鏡利用光源的斜射光進行成像,因此調節光闌至適當的大小是非常重要的。調節光闌時,需要確保聚光鏡光斑的光線幾乎不直接照射到樣品上,只有散射光能通過樣品來形成圖像。

    • 在顯微鏡的觀察過程中,通過逐步調節光闌,可以獲得較為理想的圖像效果。

  2. 調整樣品位置和焦距

    • 用粗調焦旋鈕將樣品移到大致的焦距范圍內。暗場觀察中,通常需要通過較細致的微調調節焦距,以確保樣品的細節清晰可見。

    • 調節焦距時,確保圖像中心清晰,并且背景保持黑暗。

  3. 使用適當的濾光片(如有需要)

    • 如果需要提高對比度或進行特定的樣品觀察,可以使用適合的濾光片。根據需要選擇合適的濾鏡,以增強或抑制特定波長的光。

四、觀察樣品

  1. 細致調整焦距

    • 通過微調焦距,使樣品的細節清晰顯示。如果樣品處于運動狀態,注意觀察過程中樣品的變動情況。

  2. 觀察圖像

    • 在暗場模式下,背景應保持黑暗,而樣品的細微結構則應顯示為明亮的光點或細線條。這種效果是通過樣品的散射光所產生的。

    • 在不同倍率下,觀察細胞、微生物或其他樣品的細節。暗場觀察使得透明、無色的結構如細胞質、細胞膜等能夠在黑色背景下清晰可見。

  3. 調節對比度和亮度

    • 如果圖像亮度過高或對比度不夠,可以適當調整光源亮度或光闌大小。

    • 如果圖像過于模糊或不清晰,可以進一步微調焦距或物鏡位置。

五、圖像記錄與分析

  1. 拍照與記錄

    • 如果需要記錄實驗結果,可以使用顯微鏡的攝影系統,連接數字攝像頭或相機進行拍照。奧林巴斯CX43顯微鏡支持多種圖像采集設備,能夠幫助用戶保存樣品圖像。

    • 在拍照時,確保樣品處于清晰焦距,背景依然保持黑暗,樣品細節明顯可見。

  2. 數據分析

    • 通過顯微鏡采集的圖像,可以使用相關圖像處理軟件進行進一步分析,研究樣品的形態、分布等信息。

六、結束使用

  1. 關閉光源與設備

    • 觀察完畢后,首先關閉顯微鏡的光源,然后關閉顯微鏡的電源。確保設備處于安全關閉狀態,以延長設備壽命。

  2. 清潔設備

    • 使用暗場觀察模式時,聚光鏡、物鏡等部分可能會有油漬或其他污染物,因此使用前后需要清潔設備。

    • 清潔物鏡和聚光鏡時,使用專用的清潔紙或布,不要直接觸碰鏡頭表面。

小結

使用奧林巴斯顯微鏡CX43的暗場功能時,核心要點是選擇適當的物鏡和聚光鏡,合理調節光源亮度、光闌以及焦距,以確保圖像的高對比度和清晰度。暗場功能特別適用于觀察透明或低對比度樣品,能夠幫助研究人員深入了解細胞結構、微生物活動等細節。通過適當的操作,您可以獲得高質量的暗場圖像,推動相關科研工作的發展。



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