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ELISA試劑盒測定操作非常簡單

來源:上海撫生科技發(fā)展有限公司   2014年08月05日 13:39  

ELISA試劑盒測定操作非常簡單

    臨床標(biāo)本zui為常用的是血清(漿),ELISA試劑盒有時由于特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集,要留意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。再如治療藥物的檢測,應(yīng)根據(jù)藥代動力學(xué)選擇服藥后的zui適時間抽血檢測。又如當(dāng)從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r,ELISA試劑盒血清中腎素活性將泛起顯著增高。如可的松在早晨4~6點之間,會有一峰值泛起:生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式開釋,因此,在測定此類激素時,有必要在緊密親密相連的時間距離內(nèi)采取數(shù)份血樣本,以其中間值為測定值。只是在處理和保存方面要考慮以下幾個方面:
    ELISA試劑盒樣本的長時間保存,應(yīng)在-70 ℃以下。樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。,一般涉及到標(biāo)本的收集保存、試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報告及解釋等方面,ELISA試劑盒其中任一步驟的不當(dāng)都會影響測定結(jié)果,且尤以加樣、溫育和洗板等ELISA試劑盒步驟為甚。正確的加樣方法應(yīng)為45度,吸頭貼著孔壁加入,應(yīng)注意角度太小,會使液體殘留在孔壁上,導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確;吸頭應(yīng)當(dāng)貼著管壁和液面的交界處!

    首先要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則可以在2~8 ℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。

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