13. Q:变异系数(CV)较大的原因?
A:
可能原因 | 参考解决方案 |
孔中有气泡 | 加样小心,避免读数前产生气泡 |
孔板洗涤不均/不充分 | 确保每次洗涤达到要求,按建议洗涤 |
试剂混合不充分 | 确保试剂已充分混合 |
加样量不一样 | 使用校准好的移液器确保每孔加样量一致 |
边缘效应 | 试剂盒提前恢复室温,保证所有试剂温度一致 |
样品制备/保存不一致 | 确保始终如一的样品,避免不同批次/保存条件造成的差异 |
14. Q:标准曲线较差?
A:
可能原因 | 参考解决方案 |
标准品稀释不当 | 确认是否正确稀释 |
标准品复溶不当 | 标准品复溶前短暂离心,确保是否充分溶解 |
标准品降解 | 确认保存方式及存放时间 |
曲线和标度不适合 | 尝试不同的拟合方式 |
边缘效应 | 试剂盒提前恢复室温,保证所有试剂温度一致 |
移液出错 | 使用校准好的移液器和正确的移液方法 |
标准品有污染 | 小心操作,避免污染 |
错误的孵育时间或温度 | 按照说明书的流程中操作 |
15. Q:高背景或阴性对照值偏高
A:
可能原因 | 参考解决方案 |
洗板不充分 | 将洗涤液注入反应孔充分洗涤,充分拍干孔中液体 |
酶结合物过量 | 检查酶稀释度,按说明书标识的稀释度稀释 |
底物污染 | 加底物前检查底物是否为透明无色,请勿用变蓝的底物,重新用新的底物试验 |
阴性对照孔被阳性对照污染 | 注意洗涤时不要把洗液溢出孔外,不使阴阳对照孔液体涟接一起 |
不同批次试剂混用 | 检查试剂批号,请勿用不同批次试剂 |
终止后太长时间读数 | 终止后应立即读数 |
16. Q:显色信号弱
A:
可能原因 | 参考解决方案 |
试剂过期 | 检查试剂盒有效期,请勿用过期试剂 |
孵育时间过短 | 按说明书中规定的时间孵育 |
试剂污染 | 检查试剂是否污染,请勿用污染的试剂 |
酶标仪滤光片不匹配 | 检查酶标仪设置及滤光片是否匹配 |
试剂盒平衡不充分 | 确保试剂盒试验前平衡至室温 |
显色时间不够 | 增加底物显色时间 |
17. Q:无显色信号
A:
可能原因 | 参考解决方案 |
检测抗体、酶、或显色剂漏加 | 检查试验操作流程,重复试验 |
酶被叠氮钠污染 | 请使用重新配制的试剂 |
试剂添加顺序有误 | 检查复核试验添加顺序、流程,重复试验 |
波长不正确 | 核实检测波长 |
18. Q:标曲佳但样品孔无信号
A:
可能原因 | 参考解决方案 |
样品中靶标物含量低或样品中无靶标物 | 设置阳性对照,重复实验 |
样品基质效应影响检测 | 重新稀释样品后复测 |
标曲选择不合适 | 更换拟合方式,选最合适的拟合方式 |
样本含量低于灵敏度 | 浓缩样本或更换灵敏度更高的试剂盒 |
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