5. Q:明确标明种属的试剂盒可以用来检测其他种属的样本么?
A:ELISA试剂盒严格区分种属,一般不推荐跨种属检测,不同种属的同一个指标同源性相差可能会很大,抗体的特异性要求比较高,不同种属样本与抗体结合能力会有很大差别。
6. Q:ELISA试剂盒只能检测血清、血清、细胞上清液么?
A:通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,可以是血清、血浆、细胞上清等常规样品,也可以是尿液、细组织匀浆液、细胞裂解液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。样品中含有影响生物活性的物质会影响检测结果。
7. Q:试剂盒中的酶标板是包被好的么?
A:剂盒中提供的包被板已经包被过检测抗体,可以直接使用。进行ELISA实验时仅限使用本试剂盒中的组分,不能使用别的板条进行实验。96孔酶标板是可拆的,每条8孔。可以根据自己的实验取出部分板条使用,剩余的酶标板放回含有干燥剂的铝箔袋中,4度保存,不会影响酶标板性能。若拆封的酶标板没有正确储存,导致板子受潮,可能会影响检测结果。用过的板条不可重复使用。
8. Q:试剂盒在使用前要室温放置30min ,目的是什么?
A:ELISA试剂盒对于温度的要求比较严格,温度是ELISA结合反应的重要影响因素,这样做主要是为了使试剂温度一致,在后面的温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。
9. Q:试剂盒保存温度是多少度?为什么说明书上写的标准品是-20度,标签上写的是4度呢?
A:试剂盒保存温度是4度,说明书中只有标准品标注的保存温度是-20度,由于标准品是冻干的重组蛋白,-20度保存会延长重组蛋白的保存期限。试剂盒的有效期是6个月,冻干的重组蛋白能够在4度保存6个月,但是如果有条件或者想更长时间保存,还是建议能够将标准品-20度保存。
10. Q:样本收集后不能及时检测低温保存可以放多久?
A:样本收集后24之内进行检测,放在4度冰箱即可。如果样本收集后不能立即检测,需将样本置于低温冰箱中,样本3个月内检测可于-20度保存,若存放时间更久,需要用-80度冰箱保存。
11. Q:样品反复冻融影响大么?
A:样品反复冻融对蛋白影响非常大,能导致蛋白降解,非常不建议反复冻融样品。一般蛋白含量丰富的样本例如血清/血浆反复冻融1-2次,对于检测结果影响不是非常大,但是其他类型的样本,例如细胞上清液、肺泡灌洗液,反复冻融会使蛋白降解严重,对检测结果影响非常大。
12. Q:生物素化抗体和酶结合物,稀释后没用完,还可以再用吗?
A:稀释后的生物素化抗体和酶结合物建议在当天用完,放置时间太长可能会影响其活性??筛葑约菏笛樗栌昧拷信渲?,不建议过量配制。
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