Vector Laboratories公司TrueVIEW自发荧光淬灭试剂盒:常见问题解答
本篇为大家带来的是Vector品牌的TrueVIEW自发荧光淬灭试剂盒常见问题解答,如大家想购买该试剂盒产品,或咨询更多关于该产品的问题,技术方面的支持,都可以联系Vector全国总代理商—欣博盛生物。
1、是否有已发表的参考文献描述了TrueVIEW自发荧光淬灭试剂盒的应用?
答:是的。在科学文献中有多篇已发表的参考文献描述了该试剂盒的应用。具体请在SP-8400产品详情页的Citations部分中查阅相关参考文献。
2、在应用TrueVIEW自发荧光淬灭试剂后的清洗步骤中,我可以使用PBS以外的缓冲液或去垢剂吗?
答:不可以。我们发现使用TBS或HEPES缓冲液清洗会导致TrueVIEW试剂从组织脱落;去垢剂也是不相容的。
3、TrueVIEW工作液可以保存多久?
答:TrueVIEW工作液一旦配制完成后,可在工作台或冰箱中(2-8℃)保存约48小时,可维持其活性或功能。而超过48小时,则建议丢弃未使用的TrueVIEW工作液并根据实验需要配制新的工作液。
4、TrueVIEW能减少由脂褐素引起的自发荧光吗?
答:TrueVIEW不能减少由脂褐素引起的自发荧光。TrueVIEW的工作液通过静电作用机制,能显著减少或消除因使用醛类固定剂而引起的荧光;也能有效减少来自胶原蛋白、弹性蛋白和红细胞等组织成分的荧光。
5、当使用TrueVIEW时,我的组织切片变成蓝色的了,这是正常的吗?
答:这是正常的。TrueVIEW工作液呈蓝色,会将组织切片“染成”蓝色,这表示该试剂正在发生反应。不过切片上的蓝色不会发出荧光,不会干扰免疫荧光应用。
6、使用TrueVIEW时,我可以使用哪些封片剂?
答:两种TrueVIEW产品(SP-8400和SP-8500)均随附提供2 mL的VECTASHIELD® Vibrance防荧光淬灭封片剂,建议使用随附的封片剂以获得最佳效果。我们发现,在使用TrueVIEW时,封片剂对维持高信噪比起着关键作用。目前,我们暂无充分的数据证明其他供应商的封片剂可以和TrueVIEW搭配使用。如果用其他封片剂替代VECTASHIELD® Vibrance,可能会导致效果不佳。
7、为什么TrueVIEW自发荧光淬灭试剂要在免疫荧光(IF)完成后才使用,而不是在实验流程开始时使用?
答:在产品开发过程中,我们发现将TrueVIEW淬灭试剂应用在标准免疫荧光流程结束后,能实现最-理-想的自发荧光信号减弱效果。该试剂在封片时仍保留在组织上,从而实现持续的淬灭作用,并且对特异性的荧光信号几乎不产生任何影响。然而,在染色流程非常简短的应用中(例如使用直接与荧光基团偶联的一抗),在实验开始时应用TrueVIEW淬灭试剂可能同样有效。
TrueVIEW自发荧光淬灭试剂盒
VectorLabs公司提供的True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit试剂盒,旨在去除组织切片中由于醛固定、红细胞以及胶原蛋白/弹性蛋白结构造成的自发荧光。该试剂盒包含防荧光淬灭的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片剂(含或不含DAPI两种)??突扌璧ザ拦郝蚍馄?,经济、实用。
True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit | ||
货号 | SP-8400-15 | SP-8500-15 |
规格 | 1kit | 1kit |
染色切片数 | 100-150 | 100-150 |
是否含DAPI | 不含DAPI | 含DAPI |
试剂盒组成 | Vector TrueVIEW Reagent A,5ml Vector TrueVIEW Reagent B,5ml Vector TrueVIEW Reagent C,5ml VECTASHIELD Vibrance® Antifade Mounting Medium,2ml | Vector TrueVIEW Reagent A,5ml Vector TrueVIEW Reagent B,5ml Vector TrueVIEW Reagent C,5ml VECTASHIELD Vibrance® Antifade Mounting Medium with DAPI,2ml |
SP-8400-15使用案例:
样本:人胰腺(FFPE),染色胰岛素(绿色),DAPI(蓝色)。未使用TrueVIEW处理(左图);使用TrueVIEW处理(右图),自发荧光明显减少,特异性染色得以保留。
SP-8500使用案例:
样本:人扁桃体(FFPE),染色AE1/AE3(绿色),DAPI(蓝色)。未使用TrueVIEW处理(左图),使用TrueVIEW处理(右图),自发荧光明显减少,特异性染色得以保留。
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